tag:blogger.com,1999:blog-90462032591226483362023-11-16T03:04:24.726-08:00Tissue Culture and Agricultureadrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.comBlogger17125tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-12004579762944015532016-01-31T20:19:00.002-08:002016-01-31T20:19:38.080-08:00Kumpulan Jurnal GratisHai para mahasiwa, eh mahasiswa.. bagai mana keadaan keuangan kalian dan bagaimana keadaan kesehatan.. naha hari ini saya akan posting tentang jurnal gratisan.. sebenarnya tinggal cari sih tapi saya memudahkan pencarian ini..nih Jurnal nya..<br />
<br />
Tree Seed Manageman <a href="http://adf.ly/1WGhxR" target="_blank">http://adf.ly/1WGhxR</a><br />
Teknik Pembibitan Tanaman <a href="http://adf.ly/1WGjhq" target="_blank">http://adf.ly/1WGjhq</a><br />
Teknik Budidaya Tanaman <a href="http://adf.ly/1WGk3o" target="_blank">http://adf.ly/1WGk3o</a><br />
Konsep Revitalisasi Sistem Perbenihan Tanaman <a href="http://adf.ly/1WGkuO" target="_blank">http://adf.ly/1WGkuO</a>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-5373630783324056222010-04-07T20:09:00.000-07:002010-04-07T20:09:00.844-07:00Gejala Vtrifikas Dalam Kultur JaringanDalam kultur jaringan sering sekali mendapat kendala yang mungkin kendala itu tidak mudah untuk kita atasi, hal ini dapat dipengaruhi oleh banyak factor baik itu dari luar, dari dalam atau eksplan tersebut. Hal ini kerap di temui oleh seniman tanaman khususnya kultur jaringan. Misalnya kendala <b>vitrifikasi.</b><br />
Menurut Untung, 2004 Vitrifikasi adalah suatu istilah problem dalam kultur jaringan yang ditandai dengan :<br />
- Munculnya pertumbuhan dan peekembangan yang tidak normal.<br />
- Tanaman yang dihasilkan pendek-pendek atau kerdil, seringkali tidak mempunyai internodus<br />
- Pertumbuhan batang cenderung kearah pertambahan diameter<br />
- Daunya memiliki kecenderungan melebar pada bagian pangka, akhirnya helaian berbentuk seperti panah.<br />
- Daun memiliki klorofil yang sedikit di bandingan denga yang normal.<br />
- Hal yang penting tangkai dan helaiyan daun seperti mengeluarkan air tembus cahaya dan rapuh.<br />
- Tanaman utuhnya menjadi sangat turgescent<br />
- Pada daunnya tidak memiliki jaringan palisade<br />
<br />
Viltrifikasi terjadi akabat kegagalan atau adanya hambatan pada proses pembentukan dinding sel (jaringan parenkim) dan hambatan pada proses lignin.<br />
Beberapa cara untuk mengatasi adanya vitrifikasi telah dilakukan misalnya: menaikan jumlah agar dan sukrosa, menambahkan pectin kedalam media, memindahkan kultur pada suhu 4 derajat Celsius selama 15 har, menurunkan pH menjadi 4. Penggunaan senyawa anhydrous berupa CaSO4 pada desicator, penggunaan media semi padat dll.<br />
<div><br />
</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-54599345399820396012010-03-19T11:55:00.000-07:002010-03-19T12:09:35.701-07:00Kultur Jaringan di Balik Camera<div style="text-align: center;">Inilah gambar tanaman krisan dengan umur 4 minggu setelah sub kultur.. saya mencoba untuk mengabadikannya di bawah sinar lampu yang berwarna kuning.</div><span id="goog_1269021419916"></span><span id="goog_1269021419917"></span><br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><br />
</div><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiA-MRwpLPErLqZuQopwcWQvlqfNcedHoptU5NzOfm5C1qJnGu3bO-omfKiA_NbWBsRYTw-NgRy208t0LcCyMudGW5GCDcQwCDwmkLfdvADTl2eG37lVhXlWNZL1ZV575Kp72Y-KYI8Ads/s1600-h/krisan+1.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiA-MRwpLPErLqZuQopwcWQvlqfNcedHoptU5NzOfm5C1qJnGu3bO-omfKiA_NbWBsRYTw-NgRy208t0LcCyMudGW5GCDcQwCDwmkLfdvADTl2eG37lVhXlWNZL1ZV575Kp72Y-KYI8Ads/s320/krisan+1.jpg" /></a><br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhXX97HdBrmJ3H8OGTMuJIG4WK05Y_QqIGl67MX3Epv1gZHvVS5Hgn_6XYT2VzFi9zp6hKgGRiO9UMCUFMEvj3wULFAHyitMLQNpKgNYP0mBKv5w75KnrzsmrdK3fgmjLYDOhfsihrQeFc/s1600-h/PA070075.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhXX97HdBrmJ3H8OGTMuJIG4WK05Y_QqIGl67MX3Epv1gZHvVS5Hgn_6XYT2VzFi9zp6hKgGRiO9UMCUFMEvj3wULFAHyitMLQNpKgNYP0mBKv5w75KnrzsmrdK3fgmjLYDOhfsihrQeFc/s320/PA070075.JPG" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj0u4BDYCc3xey6rBOS74DWnSTdXUAYbImrqfwoMbmxN6HIKG5e5yJfR0wLOg-y-6WdnfRKtid7_2oMi_V9ZhGO28WggN7ZPbrCVVbo1zcOHycgnyhWWN39Q9NzXh4w-B6foar6ztxAr0Y/s1600-h/PA150019.JPG" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj0u4BDYCc3xey6rBOS74DWnSTdXUAYbImrqfwoMbmxN6HIKG5e5yJfR0wLOg-y-6WdnfRKtid7_2oMi_V9ZhGO28WggN7ZPbrCVVbo1zcOHycgnyhWWN39Q9NzXh4w-B6foar6ztxAr0Y/s320/PA150019.JPG" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"></div><div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjhFyRi735gFWCCu6J0EpfKKOYxTEPeJCUwhI9jTWmkRKKmOsjRSGfGynhDYf6DMo2o4ZzU4udDSLbeVE85QF983SEg5plOjgE9D-yAZGsfX1G81HIYKXnxKh8Fz0GkQ_H4A6bC5VVkwis/s1600-h/PA160062.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjhFyRi735gFWCCu6J0EpfKKOYxTEPeJCUwhI9jTWmkRKKmOsjRSGfGynhDYf6DMo2o4ZzU4udDSLbeVE85QF983SEg5plOjgE9D-yAZGsfX1G81HIYKXnxKh8Fz0GkQ_H4A6bC5VVkwis/s320/PA160062.JPG" /></a></div><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiIuuEqRvc6CTSN7W7YZ4gUWU3h1go_z9T9hzcDoQuNk-i6_APRJWJvkQmrRGlNlLydJLpGzwIB9SanVxD4dNbOB8W6IeF8T-drOrQWvJVjFu7lzNFOaS7ZDAmy6X0xkPZOFXPSuDqSMUs/s1600-h/PA070052.JPG" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiIuuEqRvc6CTSN7W7YZ4gUWU3h1go_z9T9hzcDoQuNk-i6_APRJWJvkQmrRGlNlLydJLpGzwIB9SanVxD4dNbOB8W6IeF8T-drOrQWvJVjFu7lzNFOaS7ZDAmy6X0xkPZOFXPSuDqSMUs/s320/PA070052.JPG" /></a><br />
<br />
<div style="text-align: center;">Ke 4 foto yang berada di atas dan disebelah kanan ini adalah foto tanaman krisan dengan pembudidayaan kultur jarigan, saya mencoba untuk mengabadiakanya. foto ini diambil pada saat saya melakukan magang di salah satu Balai Penelitian di Malang Jawa Timur.</div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjJ1uT-byqmCafqicOaIBhLtXPEvdcWljUP8Ah4-YbHHkOXDCR96LXAd7QV6rqN6PTQEvOa3zotP6EfUuP3imBFvJfbmdwARd1C4aoywFvX0hg703W3dnJItndHsWJiLPK3cioqDVTuOOY/s1600-h/PA070078.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjJ1uT-byqmCafqicOaIBhLtXPEvdcWljUP8Ah4-YbHHkOXDCR96LXAd7QV6rqN6PTQEvOa3zotP6EfUuP3imBFvJfbmdwARd1C4aoywFvX0hg703W3dnJItndHsWJiLPK3cioqDVTuOOY/s320/PA070078.JPG" /></a></div><br />
<br />
<div style="text-align: center;">Ini adalah planlet tanaman pisang namun tanaman ini mengalami browning sehingga terlihat hitam. namun tataletak yang rapi membuat saya untuk mengambil gambarnya.</div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjm4hlfwNuLmnBkLTOwmGxZdVqqgCuZYmSHFWeVDMRwEfn6tUH2VEMjyGpEA9pFKTV0F10EDSXEtoNU9qSIWRBg35asgl5qjPICxmuYyczi-u4NBPoIZPP3EoJDqhdwqk5DFtUhIRsmHHo/s1600-h/PA300274.JPG" imageanchor="1" style="clear: left; display: inline !important; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjm4hlfwNuLmnBkLTOwmGxZdVqqgCuZYmSHFWeVDMRwEfn6tUH2VEMjyGpEA9pFKTV0F10EDSXEtoNU9qSIWRBg35asgl5qjPICxmuYyczi-u4NBPoIZPP3EoJDqhdwqk5DFtUhIRsmHHo/s320/PA300274.JPG" /></a><br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgd0k3JMwofdkcOvAPZWQ4uxtPWUULb5xY6Z5-E_rbL83X8G1jApKDInLhyPKI42yHBEMe6dMRmPACnKV43CQgjShNTvJqAr7xefuU09hj_Try8aPRSziRVy1ciaVXbxVqcy7-rSqQCCHY/s1600-h/PA300276.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgd0k3JMwofdkcOvAPZWQ4uxtPWUULb5xY6Z5-E_rbL83X8G1jApKDInLhyPKI42yHBEMe6dMRmPACnKV43CQgjShNTvJqAr7xefuU09hj_Try8aPRSziRVy1ciaVXbxVqcy7-rSqQCCHY/s320/PA300276.JPG" /></a><br />
<div style="text-align: center;">Ini adalah tanaman antorium corong yang dikultur jaringankan.. tanaman ini adalah tanaman yang di teliti oleh peneliti di Balai Penelitian tersebut.</div><br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"></div><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhzEVHu3T01eWrQ9hio-HYo-6smHeFTGIUozFv08aP8hcYo33mltKxVHfRWfhInbqQyaPhiL8uE4rry5QlYA00B8BSlHrJqpBQlrpnjW-8Q0r5jRJagQ9eu-2_1Ka2SOwbdABtrxKoobW0/s1600-h/PA210046.JPG" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhzEVHu3T01eWrQ9hio-HYo-6smHeFTGIUozFv08aP8hcYo33mltKxVHfRWfhInbqQyaPhiL8uE4rry5QlYA00B8BSlHrJqpBQlrpnjW-8Q0r5jRJagQ9eu-2_1Ka2SOwbdABtrxKoobW0/s320/PA210046.JPG" /></a><br />
<br />
<br />
<br />
<div style="text-align: center;">Ini adalah tanaman kentang yang dibuat kultur jaringan. tanaman ini negeluarkan umbi atau kentangnya di bagian akar sehingga saya tertarik untuk menggambilnya. mungkin saya pertamakali melihat umbi kentang yang tumbuh di dalam botol.</div><br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgBhthyphenhyphen4-A3B2PlzmQa2vzGu0DkfkCzxr3604x09MWfeaPIQMxOkK0w7pmPS6M0fCOh1LrE0PYU0WaU6eBwuF2oOqHUUJX3SQoOGdfw4jIyqHtk06j6VAUHyxHFj2z2T8HQMexC0cpT8BE/s1600-h/PA160055.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"></a><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgBhthyphenhyphen4-A3B2PlzmQa2vzGu0DkfkCzxr3604x09MWfeaPIQMxOkK0w7pmPS6M0fCOh1LrE0PYU0WaU6eBwuF2oOqHUUJX3SQoOGdfw4jIyqHtk06j6VAUHyxHFj2z2T8HQMexC0cpT8BE/s1600/PA160055.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; float: right; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em; text-align: center;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgBhthyphenhyphen4-A3B2PlzmQa2vzGu0DkfkCzxr3604x09MWfeaPIQMxOkK0w7pmPS6M0fCOh1LrE0PYU0WaU6eBwuF2oOqHUUJX3SQoOGdfw4jIyqHtk06j6VAUHyxHFj2z2T8HQMexC0cpT8BE/s320/PA160055.JPG" /></a><span class="Apple-style-span" style="-webkit-text-decorations-in-effect: none; color: black;"></span></div><div style="text-align: center;"><span class="Apple-style-span" style="-webkit-text-decorations-in-effect: none;"><br />
</span><br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgBhthyphenhyphen4-A3B2PlzmQa2vzGu0DkfkCzxr3604x09MWfeaPIQMxOkK0w7pmPS6M0fCOh1LrE0PYU0WaU6eBwuF2oOqHUUJX3SQoOGdfw4jIyqHtk06j6VAUHyxHFj2z2T8HQMexC0cpT8BE/s1600-h/PA160055.JPG" imageanchor="1" style="clear: right; display: inline !important; margin-bottom: 1em; margin-left: 1em;"><span class="Apple-style-span" style="color: black;">Masih banyak keindahan kultur jaringan dan masih banyak juga ilmu yang harus di gali dalam pembudiayaan ini. semoga hal ini dapat bermanfaat. jangan lupa komentar tentang gambar yang sederhana ini.</span></a></div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-63943431846850168852010-03-19T10:51:00.000-07:002010-03-19T10:51:37.333-07:00Aklimatisasi KrisanAklimatisasi merupakan kegiatan akhir teknik kultur jaringan. Aklimatisasi adalah proses pemindahan planlet dari lingkungan yang terkontrol ke kondisi lingkungan tak terkendali, baik suhu, cahaya, dan kelembaban. Aklimatisasi dilakukan untuk mengadaptasikan tanaman hasil kultur jaringan terhadap lingkungan baru sebelum ditanam dan dijadikan tanaman induk untuk produksi dan untuk mengetahui kemampuan adaptasi tanaman dalam lingkungan tumbuh yang kurang aseptik.<br />
Perubahan kondisi lingkungan yang drastis, dari lingkungan terkontrol ke tidak terkontrol, dari suhu relatif stabil ke suhu lingkungan yang fluktuatif, dari kelembapan tinggi ke rendah dan fluktuatif, dan dari cahaya rendah ke cahaya tinggi pada umumnya menyebabkan tanaman mudah mengalami cekaman atau stres, kehilangan air, layu, dan mati Oleh karena itu, proses aklimatisasi perlu dilakukan secara bertahap.<br />
<br />
Tanaman krisan pada kultur jaringan ini biasanya dijadikan tanaman induk dan dapat diperbanyak dengan menggunakan stek pada pucuk. Akan tetapi jika tanaman krisan ini terlalu lama distek maka akan menimbulkan turunya kualitas regenerasi. Selain itu tanaman induk yang terlalu lama di stek biasanya akan menimbulkan sumber hama dan penyakit karena pertumbuhannya yang bercabang dan mengumpul sehingga cahaya tidak dapat masuk kedalam daun dan hama dan penyakit biasanya bersarang di tempat itu, selain itu dapat menimbulkan reaksi gelap yang dapat merugikan. Menurut Iknas (2008), reaksi gelap ini dapat menimbulkan tanaman ke fase generatif, jadi bibit yang seharusnya di fase vegetatif menjadi fase generatif sehingga tanaman menjadi berbunga karena tanaman induk kan di jadikan bibit maka akan merugikan<br />
Reaksi gelap adalah reaksi pembentukan gula dari CO2 yang terjadi di stroma. Berbeda dengan reaksi terang, reaksi gelap atau reaksi tidak bergantung cahaya bisa terjadi pada saat siang dan malam, namun pada siang hari laju reaksi gelap tentu lebih rendah dari laju reaksi terang. Reakasi glap ini memanfaatkan ATP dan NADPH dari reaksi terang yaitu fotosintesis untuk mereduksi CO2 menjadi gula.<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiDJ4YuN_e5C2gNZDUjyarjCr5uD_byZP5bzBbV_qAU6nSQaV9I3Z8ElzAu9tyYjqPF44sNO88waceZoPuOr06ERZPnLvQ29d-G01mU847OLUfxOBTBk11D351beqaMbTeN3ShLSRsP2n4/s1600-h/kelvin.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="268" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiDJ4YuN_e5C2gNZDUjyarjCr5uD_byZP5bzBbV_qAU6nSQaV9I3Z8ElzAu9tyYjqPF44sNO88waceZoPuOr06ERZPnLvQ29d-G01mU847OLUfxOBTBk11D351beqaMbTeN3ShLSRsP2n4/s640/kelvin.jpg" width="640" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar . Silus Kelvin (Raksi Gelap)</div><br />
<br />
Tetap terjadi pada saat ada cahaya/ siang hari. Reaksi gelap ini akan hilang dengan dengan sendirinya apabila tanaman tersebut dikondisikan seperti bibit pada umumnya, akan tetapi reaksi gelap ini akan membutuhkan waktu yang cukup lama untuk hilang.<br />
Sebelum penanaman pada tunas-tunas yang telah di stek, batang bawah yang terdapat luka di olesi zat perangsanng akar. Zat perangsang akar ini dapat menggunaka IBA atau Rutoon.<br />
Pemotongan pada tanaman ini di lakukan sampai ke generasi G3 atau G4 hal ini agar dapat menekan terjadinya generasi yang kurang berkualitas sehingga jika sampai ke G3 atau G4 maka bibit harus segera siap di tanam di lapangan (Iknas 2008).<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiyV9pKUmCDkxTghRyoAPKrO-sGZAoheeshnV8jz9HwgdDfkxS5I7TcWcOCqpyZLYC_VZkvQowOP0l6OsbjMFtfQmnQffIe875sL5Oshqm2sXxc2iX4fJUStIDZz-VO_TF38OY8BnvemKY/s1600-h/kelvin2.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="640" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiyV9pKUmCDkxTghRyoAPKrO-sGZAoheeshnV8jz9HwgdDfkxS5I7TcWcOCqpyZLYC_VZkvQowOP0l6OsbjMFtfQmnQffIe875sL5Oshqm2sXxc2iX4fJUStIDZz-VO_TF38OY8BnvemKY/s640/kelvin2.jpg" width="538" /></a></div><div style="text-align: center;">Gambar. Tanman Krisan Yang Telah di Stek dan Ditanam</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-29644325633253626992010-03-19T10:45:00.000-07:002010-03-19T10:45:57.433-07:00Cara Aklimatisasi Krisan dan Usaha di LapangUntuk proses aklimatisasi pada tanaman krisan, planlet yang berada didalam botol di ditempatkan dalam ruangan dengan kondisi lingkungan luar selama 1-2 minggu dengan bantuan paranet dengan cahaya masuk 60%, hal ini untuk mengkondisikan tanaman pada kondisi lapangan serta untuk menekan respirasi yang berlebihan pada tanaman itu sendiri karena lingkungan iklim mikro di dalam botol masih dapat digunakan oleh tanaman tersebut.<br />
Setelah tanaman tersebut memiliki daun yang hijau seperti tanaman yang berada di lapangan tanaman bisa di aklimatisai dengan menggunakan fungisida dan baktersida atau menggunakan baiclean atau sama sekali tidak menggunakan apa-apa, jadi bisa langsung tanam ke dalam media, jika media tersebut steril bebas dari mikroorganisme.<br />
Untuk media yang digunakan adalah arang sekam yang telah disterilisasi namun arang sekam ini dapat di beli ke para pedagang. Arang sekam ini sangat baik sekali terhadap proses penyemaian pada induk yang akan diperbanyak, karena pH yang netral, remah, dan dapat mengikat air dengan cukup baik, sehingga udara bisa masuk kedalam media dan akar sehingga dapat menyerap udara dengan baik. Pemakaian arang sekam harus diganti jika sudah terdapat nematoda-nematoda serta mikroorganisme yang dapat menggangu proses pertumbuhan. Setelah itu tanaman dapat di stek pada umur 14 hari dan di berikan penutup plastic bening.<br />
Stek tanman induk sangat penting sekali agar dapat menghasilkan bibit yang unggul, seragam, dan berkualitas. Untuk stek tanman induk sendiri terdapat metode yang dapat mempertahankan kualitas tanaman sehingga tanman bias di perbanyak sesuai dengan keinginan dengan sama seperti induknya. Cara-cara stek sebagai berikut:<br />
a. Krisan yang berumul 14 hari di perkirakan sudah mempunyai 7 helai daun. Tanman induk ini dapat di stek namun ditinggalkan empat daun di bawahnya, hal ini dilakukan karena untuk memacu tunas lateral tumbuh kembali karena setiap daun memiliki cadangan makanan yang dapat menumbuhkan tunas lateral tersebut dan jika daun tersebut tidak ada atau di sisakan dua maka proses penumbuhan tunas lateral akan sulit karena cadangan makanan pada daun yang sedikit akan disebarkan kesetiap organ tumbuhan sehingga penyuplaian cadangan makanan akan sedikit.<br />
b. Setelah 14 hari kembali tanamn krisan yang telah dipotong dan menyisakan empat buah helai daun dan di setiapiak daun kan tumbuh tunas lateral yang seragam. Namun pertumbuhan tunas lateral atas akan lebbih dulu berkembang dibandingkan dengan yang bawah. Pemotongan dapat dilakuna ke pada dua tanaman yang timbul pada tunas lateral namun kembali sisakan dua daun untuk menumbuhkan kembali tunas lateral. pemotongan ini dilakukan pada tunas lateral bawah.<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEihTW_saZVnPukTLqiz-Zx5ub1b5fFCZ4WN87SalhvhVJxWOGkHRVzGcSSAQ8vBI9FZFNZeXCkva3YilKHRaXAithfaTioFJjYGBZyj7A5fBHiA3E3y4F6ZJAtGpopogswgpuOvS0XcST0/s1600-h/krisan+1.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="244" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEihTW_saZVnPukTLqiz-Zx5ub1b5fFCZ4WN87SalhvhVJxWOGkHRVzGcSSAQ8vBI9FZFNZeXCkva3YilKHRaXAithfaTioFJjYGBZyj7A5fBHiA3E3y4F6ZJAtGpopogswgpuOvS0XcST0/s640/krisan+1.jpg" width="640" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar. Stek Awal Tanaman Induk Krisan</div><br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiRDhAIgAwoOlgzNiyy-O76xKdsLC85EPqUyx9k7uTGgvP2Q6uMn1YwwUipM1O1pJN2SZY3UOAVj6OUMADJ3XOWhhY2GMkf9aAUnl6ygt0mtIDReCI7509HYhGRlPJWYYaHdUtICk7LAKc/s1600-h/krisan+3.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="310" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiRDhAIgAwoOlgzNiyy-O76xKdsLC85EPqUyx9k7uTGgvP2Q6uMn1YwwUipM1O1pJN2SZY3UOAVj6OUMADJ3XOWhhY2GMkf9aAUnl6ygt0mtIDReCI7509HYhGRlPJWYYaHdUtICk7LAKc/s640/krisan+3.jpg" width="640" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar. Timbulnya Tanaman Baru pada Ketiak Daun</div><br />
<br />
c. Tanaman yang baru akan muncul pada ketiak daun yang telah diambil bagian atas tanamannya. Pemotongan ini dilakukan terus menerus selama 5 bulan, namun seringkali tanaman induk ini dapat bertahan sampai satu tahun jika kualitasnya masih baik.<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj13xp3F0XGle4ORCu7haaWGaRitWmNK2Q4dRNlfsHlns8IHInUyzu6FRaxfqMcjjp_3JfZoPDAXkS4J1E6HB1SoXUi4zzl2u9TxQWH_0KqayyHdDzgO2zFGmGy43JSwn14vseJbh7uqMw/s1600-h/krisan+2.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="432" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj13xp3F0XGle4ORCu7haaWGaRitWmNK2Q4dRNlfsHlns8IHInUyzu6FRaxfqMcjjp_3JfZoPDAXkS4J1E6HB1SoXUi4zzl2u9TxQWH_0KqayyHdDzgO2zFGmGy43JSwn14vseJbh7uqMw/s640/krisan+2.jpg" width="640" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;"><br />
</div><div style="text-align: center;">Gambar. Terdapat Tanaman Baru Yang Tumbuh pada Ketiak Daun</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-69964439249311962222010-03-19T10:23:00.000-07:002010-03-19T10:23:10.873-07:00Aklimatisasi AnggrekAklimatisasi adalah masa adaptasi tanaman hasil pembiakan pada kultur jaringan yang semula kondisinya terkendali kemudian berubah pada kondisi lapangan yang kondisinya tidak terkendali lagi, disamping itu tanaman juga harus mengubah pola hidupnya dari tanaman heterotrop ke tanama autotrop.<br />
Dalam melakukan aklimatisasi pengelompokan plantlet hasil seleksi. Plantlet dikelompokan berdasarkan ukurannya untuk memperoleh bibit yang seragam. Sebelum ditanam plantlet sebaiknya diseleksi dulu berdasarkan kelengkapan organ, warna, hekeran pertumbuhan, dan ukuran. Plantlet yang baik adalah yang organnya lengkap, mempunyai pucuk dan akar, warna pucuknya hijau mantap artinya tidak tembus pandang dan pertumbuhan akar bagus.<br />
Menurut Trubus (2005) ciri-ciri bibit yang berkulitas baik yaitu planlet tampak sehat dan tidak berjamur, ukuran planlet seragam, berdaun hijau segar, dan tidak ada yang menguning. Selain itu planlet tumbuh normal, tidak kerdil, komposisi daun dan akar seimbang, pseudobulb atau umbi semu mulai tampak dan sebagian kecil telah mengeluarkan tunas baru, serta memiliki jumlah akar serabut 3 – 4 akar dengan panjang 1,5 – 2,5 cm. Prosedur pembiakan dengan kultur in vitro baru bisa dikatakan berhasil jika planlet dapat diaklimatisasi ke kondisi eksternal dengan keberhasilan yang tinggi. Aklimatisasi bertujuan untuk mempersiapkan planlet agar siap ditanam di lapangan. Tahap aklimatisasi mutlak dilakukan pada tanaman hasil perbanyakan secara in vitro karena planlet akan mengalami perubahan fisiologis yang disebabkan oleh faktor lingkungan. Hal ini bisa dipahami karena pembiakan in vitro (dalam botol) semua faktor lingkungan terkontrol sedangkan di lapangan faktor lingkungan sulit terkontrol (Herawan, 2006; Yusnita, 2004).<br />
Di dalam botol kultur, kelembapan hampir selalu 100%. Aklimatisasi merupakan tahap kritis karena kondisi iklim mikro di rumah kaca, rumah plastik, rumah bibit, dan lapangan sangat jauh berbeda. Kondisi di luar botol berkelembapan nisbi jauh lebih rendah, tidak aseptik, dan tingkat intensitas cahayanya jauh lebih tinggi daripada kondisi di dalam botol.planlet atau tunas mikro lebih bersifat heterotrofik karena sudah terbiasa tumbuh dalam kondisi berkelembaban sangat tinggi, aseptik, serta suplai hara mineral dan sumber energi berkecukupan.<br />
Disamping itu, tanaman tersebut memperlihhatkan gejala ketidaknormalan, seperti bersifat sangat sukulen, lapisan kutikula tipis, dan jaringan vasikulernya tidak berkembang sempurna, morfologi daun abnormal dengan tidak berfungsinya stomata sebagaimana mestinya, struktur mesofil berubah, dan aktivitas fotosintesis sangat rendah.<br />
Aklimatisasi dilakukan dengan mengkondisikan planlet dalam media pengakaran ex vitro. Media yang kita gunakan dalam proses aklimatisasi pada anggrek adalah pakis dan arang kayu / genting. Selain itu juga kelembapan tempat aklimatisasi di atur tetap tinggi pada minggu pertama, menurun bertahap pada minggu–minggu berikutnya hingga tumbuh akar baru dari planlet. Cahaya diatur dari intensitas rendah, meningkat secara bertahap. Sebaiknya suhu tempat aklimatisasi dijaga agar tidak melebihi 32oC.<br />
Setelah proses aklimatisasi anggrek diperlakukan sebagai berikut:<br />
a. Compotting<br />
Ukuran pot yang digunakan untuk kompot berdiameter sekitar 7 cm pada pot ini diisi bibit sekitar 30 bibit anggrek atau tergantung ukuran bibitnya. Pertama-tama pot yang akan digunakan diisi dengan sterofoam sekitar 1/3 bagian, kemudian pakis cacah lalu bibit anggrek ditata dengan rapi..<br />
<br />
b. Seedling (Penanaman ke Single Pot)<br />
Seedling adalah proses memindahkan bibit dari kompot ke pot individu. Seedling dilakukan pada saat bibit berusia 5 bulan. Apabila tanaman terlambat diseedling dapat mengakibatkan bibit dalam kompot kompetisi sehingga penyerapan hara terhalang dan akar beresiko menjadi rusak. Biasanya seedling dilakukan diletakkan di dalam gelas bekas air mineral. Media yang digunakan untuk setiap anggrek berbeda-beda tergantung pada kebutuhan airnya. Media untuk Dendrobium adalah sphagnum yang dibalutkan pada akar tanaman, kemudian tanaman ditanam dalam gelas plastic yang telah diisi sterofoam dan pakis cacah. Biasanya juga ditanam pada media pakis batangan yang kemudian diikat menggunakan tali raffia. Ciri-ciri dari bibit yang siap di seedling yaitu ditandai dengan perakaran yang tumbuh lebih kuat dan daun daun tampak sudah keluar dari bibir pot.<br />
<br />
c. Overpot (Pemindahan Bibit)<br />
Overpot dilakukan ketika tanaman dalam single pot memenuhi syarat untuk dipindahkan, yaitu ditandai denga banyaknya umbi. Tanamn dipindahkan ke pot yang lebih besar. Biasanya dilakukan setelah seedling berumur 2-3 bulan. Media yang digunakan adalah potongan pakis batangan yang disusun secara teratur atau satu per satu dan diikat denga tali raffia.<br />
<br />
d. Repotting<br />
Repotting atau pengepotan ulang adalah pemindahan tanaman tanaman dari pot yang lama ke pot yang baru. Repotting dilakukan jika anggrek pada pot seedling telah tumbuh besar dan memenuhi popt plastik. Pengepotan ulang dilakukan dengan alasan media dalam pot seedling telah lapuk dan hancur sehingga ph menjadi rendah (asam) dan rentan terhadap serangan penyakit (Parnata, 2005). Selain itu juga untuk mengantisipasi media yang telah kehabisan unsur hara. Media untuk repotting juga berbeda untuk setiap jenis anggrek tergantung kebutuhan airnya.<br />
<div><br />
</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-31526662906862977552010-03-19T10:21:00.000-07:002010-03-19T10:21:11.443-07:00Cara Aklimatisasi Anggrek RumahanAklimatisasi Anggrek Rumahan<br />
Aklimatisasi adalah proses pengkondisian planlet atau tunas mikro (jika pengakaran dilakukan secara ex vitro) di lingkungan baru yang aseptik di luar botol, dengan media tanah, atau pakis sehingga planlet dapat bertahan dan terus menjadi benih yang siap ditanam di lapangan (Yusnita, 2004).<br />
1. Alat dan bahan<br />
a. Pot<br />
b. Kawat ujungnya bentuk "U"<br />
c. Bayclean<br />
d. Air mengalir<br />
e. Label<br />
f. Planlet Dendrobium<br />
g. Media Pakis<br />
h. Sterofoam<br />
i. Bayclean 10%.<br />
<br />
2. Langkah Kerja<br />
a. Proses aklimatisasi dimulai dari penyiapan alat dan bahan yang akan digunakan yaitu Planlet siap diaklimatisasi pada umur 7 bulan setelah transplanting atau planlet sudah memenuhi botol.<br />
b. Botol diisi dengan air bersih kemudian dikocok untuk melarutakan media agar-agar yang masih tersisa pada botol. Botol dikocok secara perlahan untuk membersihkan agar dan melonggarkan perakaran sehingga untuk mudah dikeluarkan.<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgzgTHEWSjUtuAYgyp7iJv38pIYOeRb2iYXPRtvM_aag8dLc4muFRDprXMzxs1Tp4L8U_tmGx6fNek5q-SqMwABXITkB4FM1YHMpN7B8HAVV4IxcmOSJ5_pXZaNj9RfL46O6S-LFj7nYy4/s1600-h/aklim+2.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="300" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgzgTHEWSjUtuAYgyp7iJv38pIYOeRb2iYXPRtvM_aag8dLc4muFRDprXMzxs1Tp4L8U_tmGx6fNek5q-SqMwABXITkB4FM1YHMpN7B8HAVV4IxcmOSJ5_pXZaNj9RfL46O6S-LFj7nYy4/s400/aklim+2.jpg" width="400" /></a></div><div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><br />
</div><div style="text-align: center;">Gambar. Pengambilan Tanaman Dalam Botol</div><br />
3.Planlet dikeluarkan secara perlahan dengan cara ditarik menggunakan kawat ujungnya bentuk "U".<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg9co3ZRCauulMcJsAnyT_7LszQXyh0UkGAIo45zGVYSSI0A3ZIzplFmf-okXU0bxlWWYKRzuwrnEHWTYGxDK3lxUdCtWG62IGFJjq-SIni2optRlyU8of2g5uVy38MtxNntp6j6NwQimw/s1600-h/aklim+1.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="300" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg9co3ZRCauulMcJsAnyT_7LszQXyh0UkGAIo45zGVYSSI0A3ZIzplFmf-okXU0bxlWWYKRzuwrnEHWTYGxDK3lxUdCtWG62IGFJjq-SIni2optRlyU8of2g5uVy38MtxNntp6j6NwQimw/s400/aklim+1.jpg" width="400" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar. Pembersihan Tanaman dari Agar</div><span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"></span><br />
<br />
4. Akar dibersihkan dari sisa agar yang menempel kemudian direndam dalam larutan Baycelan 10 % selama 15 menit untuk menghindari tumbuhnnya jamur atau bakteri yang dapat membuat busuk akar atau daun.<br />
5. Planlet kemudian ditiriskan pada sebuah koran hingga mengering. Media campuran sterofoam dan pakis.<br />
6. Planlet kemudian ditanam secara merata 30 tanaman/ pot. Kompot kemudian ditempatkan ditempat teduh dan harus mendapatkan angin bebas.<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjCOZ2d5NCtGDHI7_OFjLamBmab83q28YwndwpUCn0UHabDdE_vfLEyrYR6QgLKFC9hJB8_a6ItyoE3rf27gVY42LpJKOfFbCmhsXkknH_LXVslQOs1XB3Wo5i5qgIv_eghxuWy_PX_lGY/s1600-h/aklim+3.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="301" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjCOZ2d5NCtGDHI7_OFjLamBmab83q28YwndwpUCn0UHabDdE_vfLEyrYR6QgLKFC9hJB8_a6ItyoE3rf27gVY42LpJKOfFbCmhsXkknH_LXVslQOs1XB3Wo5i5qgIv_eghxuWy_PX_lGY/s400/aklim+3.jpg" width="400" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar. Tanaman yang Sudah Dipindahkan ke Pot (Kompot)</div><br />
7. Setelah benih terlihat sehat (ditandai dengan daun kaku dan muncul akar baru) segera dilakukan pemupukan dengan pupuk daun kandungan Nitrogen tinggi atu dengan penambahan B1 seminggu sekali dan fungisida seminggu 2 kali serta penyiraman sehari sekali pada pagi hari.<br />
<div><br />
</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-4534786217595997562010-03-19T10:11:00.000-07:002010-03-19T10:11:54.954-07:00KalusKalus adalah kumpulan sel-sel yang terbentuk dari sel-sel parenkhim yang membelah secara terus menerus dan tidak terorganisir. Di alam (in vivo) fenomena pembentukan kalus terjadi pada penyakit tumor tanaman yang disebabkan infeksi oleh mikroorganisme bakteri Agrobacterium tumefaciens pada bagian tanaman yang terluka akibat gigitan serangga atau nematoda. Kalus yang diinisiasi dan dipelihara dalam media secara in vitro dapat digunakan untuk tujuan mempelajari pertumbuhan dan perkembangan tanaman atau dieksploitasi untuk tujuan perbanyakan tanaman. Keberhasilan induksi kalus ditentukan oleh: <br />
• pemilihan bahan tanaman atau eksplan <br />
• media dan kondisi kultur yang cocok <br />
<br />
Kalus dapat diinisiasi dari hampir semua bagian tanaman, tetapi organ dan jenis tanaman yang berbeda akan menunjukkan kecepatan pembelahan sel yang berbeda pula. Embrio zigotik muda dalam biji tanaman, hipkotil, kotiledon, daun dan batang muda adalah contoh-contoh eksplan yang sangat respon untuk pembentukan kalus.<br />
<br />
Pembelahan sel dari jaringan eksplan yang membentuk kalus biasanya hanya terjadi dari bagian lapisan periphery saja. Menurut Yeoman (1970), hal ini disebabkan oleh beberapa faktor antara lain: <br />
• ketersediaan O2 yang lebih tinggi <br />
• keluarnya gas CO2<br />
• ketersediaan hara yang lebih banyak <br />
• penguapan yang lebih cepat dari penghambat yang bersifat folatik <br />
• cahaya <br />
Jaringan dari eksplan batang, akar atau daun terdiri dari berbagai macam sel sehingga akan menghasilkan kalus yang heterogenous. Bahkan jaringan yang tampak seragam secara histologi seperti pembuluh tembakau dan akar ercis menghasilkan kalus dengan sel dengan DNA yang berbeda karena tingkat ploidi yang berbeda (Yeoman, 1970; Torey, 1961 dalam Gunawan, 1988). Heterogenitas dari sel-sel yang membentuk kalus selain berasal dari materi asalnya juga dapat terjadi karena masa kultur yang panjang melalui subkultur yang berulang-ulang. Menurut Gunawan (1988), perubahan dapat terjadi karena: (i) aberasi kromosom, (ii) mutasi gen, (iii) endoreduplikasi yang menghasilkan poliploidi, (iv) transposisi urutan DNA, (v) amplifikasi gen atau (vi) hiangnya satu gen.<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhKeLwOOzrWCyfARInz3rd8_cD0Gjm9nRmuOCBTkGLswoOs_VltsIV-wWGQ3fkMom5R_bIzhEBMkXQVUMYq_Ozau4NxcO3gwbmciMWy4ICbapHcsMKImoT-P2k8UxveTKQ65FpcNmxvKow/s1600-h/kalus+Ragapadmi+Purnamaningsih+2004.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhKeLwOOzrWCyfARInz3rd8_cD0Gjm9nRmuOCBTkGLswoOs_VltsIV-wWGQ3fkMom5R_bIzhEBMkXQVUMYq_Ozau4NxcO3gwbmciMWy4ICbapHcsMKImoT-P2k8UxveTKQ65FpcNmxvKow/s320/kalus+Ragapadmi+Purnamaningsih+2004.jpg" /></a></div><div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><br />
</div><div style="text-align: center;">Gambar Kalus dari Penelitian Ragapadmi Purnamaningsih 2004 </div><br />
Agar kalus dapat dijaga pertumbuhannya dan dapat diperbanyak secara berkesinambungan, maka perlu dipindahkan secara teratur pada media baru dalam jangka waktu terentu (subkultur). Apabila kalus disubkultur pada media agar yang dilakukan secara regular, maka akan menunjukkan fase pertumbuhan kurva S (sigmoid). Phillips et al., (1995) membagi lima fase pertumbuhan kalus, yaitu:<br />
• Fase lag, dimana sel-sel mulai membelah.<br />
• Fase eksponensial, dimana laju pembelahan sel berada pada puncaknya.<br />
• Fase linear, dimana pembelahan sel mengalami perlambatan tetapi laju ekspansi sel meningkat.<br />
• Fase deselerasi, dimana laju pembelahan dan pemanjangan sel menurun. <br />
• Fase stationer, dimana jumlah dan ukuran sel tetap.<br />
<br />
<br />
Menurut Thorpe (1982), kalus yang dipelihara dalam kultur sering mengalami perubahan sejalan dengan waktu, antara lain karena: <br />
• hilangnya hormon pertumbuhan yang diperlukan <br />
• hilangnya potensi morfogenetik <br />
• perubahan tekstur morfologis dari jaringan (jaringan yang ”friable”) <br />
<br />
Semua perubahan tersebut akan menurunkan daya regenerasi jaringan. Dalam beberapa kasus kehilangan daya morfogenetik dari kalus tersebut dapat dikembalikan dengan cara memindahkan kalus pada media yang mengandung sitokinin pada konsentrasi tinggi dalam periode kultur yang singkat atau melakukan subkultur yang berulang pada media untuk pembentukan tunas (Rice, et al., 1978).<br />
<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg-zmtTY6nOWqrCFL7vd7eKVLT_YMcoMH89CaWxZt2fOCBzzsSYtnUQvmqopakYqYeampe0wH0LvV3lOHI9Dg6N3IXdcHVloI_EgYX75mEJJ2X0OErjJ8cbpNBAeTzpMcD0rXaSeIn7hJQ/s1600-h/kalus+Ragapadmi+Purnamaningsih+2004+1.jpg" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg-zmtTY6nOWqrCFL7vd7eKVLT_YMcoMH89CaWxZt2fOCBzzsSYtnUQvmqopakYqYeampe0wH0LvV3lOHI9Dg6N3IXdcHVloI_EgYX75mEJJ2X0OErjJ8cbpNBAeTzpMcD0rXaSeIn7hJQ/s320/kalus+Ragapadmi+Purnamaningsih+2004+1.jpg" /></a></div><br />
<div style="text-align: center;">Gambar Kalus dari Penelitian Ragapadmi Purnamaningsih 2004</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-19885534264624901452010-03-19T10:06:00.000-07:002010-04-07T20:26:25.461-07:00Browning<span class="Apple-style-span" style="font-family: Arial; font-size: small;"><span class="Apple-style-span" style="font-size: 13px;">Biasanya</span></span> kita tidak menyadarinya bahwa buah-buahan seperti jeruk, apel, mangga, pear, pisang, dan sebagainya jika di belah akan dan di diamkan beberapa menit akan tampak warna coklat atau kehitam hitaman. Itu adalah suatu fenomena pencoklatan atau yang dikenal dengan nama browning. Pencoklatan adalah suatu karakter munculnya warna coklat atau hitam yang sering membuat tidak terjadinya pertumbuhan dan perkembangan pada tanaman atau eksplan pada kultur jaringan. Peristiwa pencoklatan adalah pristiwa alamiah biasa terjadi pada system biologi, suatu proses perubahan adaptif bagian tanaman akibat adanya pengaruh fisik dan biokimia (memar, pengupasan, pemotongan, serangan penyakit, atau kondisi yang tidak normal). Bias juga merupakan gejala alamiah dari proses penuaan,<br />
Secara umum pencoklatan (browning or blacking) berdasarkan prosesnya, dapat dikelompokan menjadi 2 macam (pengelompokan ini dapat digunakan pada bidang teknologi pangan dan gizi), yaitu:<br />
1.Pencoklatan secara enzimatik. (fenolase)<br />
2.Pencoklatan secara non enzimatik. Pada klompokan ini dapat dikelompokan menjadi 3, yaitu:<br />
a.Pencoklatan Maillard<br />
b.Pencoklatabn karamellard<br />
c.Pencoklatan oksidasi asam askorbat.<br />
<br />
Browning terjadi akaibat enzimatik ini adalah enzim. Enzim yang berperan dalam proses ini terjadinya browning adalah polifenol oksidase, suatu enzim kompleks. Enzim komplek tersebut diantaranya adalah fenol hidroksilase, kresolase dan katekolase. Untuk terjadinya reaksi pencoklatan dikatalis oleh enzim tersebut, maka selain ada subtrat juga harus ada tersedia gugus prostestik Cu++ dan oksigen sebagai asektor hydrogen. Kebanyakan reaksi pencoklatan dasar reaksi pembentukan melalim berwarna coklat reaksi pertama diduga sebagi hidrolisasi sekunder O-quinon atau karena kelebihan O-difenol.<br />
<br />
Pada proses pencoklatan enzimatis, substrat yang umunya berperan adalah:<br />
1. P-difenol (quinol)<br />
2. Monofenol (L-tirosin, p-kresol)<br />
3. Flavonoid (querssetin, rutin)<br />
4. Tannin (kateein, leukoantosianin)<br />
5. Katekol, asam kafeat, asam protokatekoat, asam klogorenat.<br />
Dari substrat-substra diatas, monofenol sifatnya lambat reaksinya sebab sebelum oksidasi menjadi quinon , zat ini harus mengalami hidroksilasi berulang.<br />
<br />
Pencoklatan juga dapat terjadi karena rangsangan kimia, prinsipnya yaitu pada lingkunagan eksplan tersedia bahan-bahan kimia yang mendorong pembentukan senyawa phenol. Sebagai missal auksin pada eksplan daun muda klapa sawit dapat mendapat mendorong terjadinya pencoklatan. Salah satu bahan kimia yang menyebabkan pencoklatan adalah enzim, yaitu enzim yang mendorong proses terjadinya oksidasi phenol (enzimya: phenol oksidase)<br />
Untuk mengatasi proses terjadinya pencoklatan dapat dilakuakn dengan berbagai cara, misalnya:<br />
1. Mengeluarkan senyawa fenol, yaitu dengan jalan membilas terus menerus dengan air atau dengan aquadest., melakukan subkult berulang ulang, mengabsorsi dengan arang aktif, mengabsorsi dengan polyvinylpirolidone (PVP).<br />
2. Memodifikasi potensial redok media<br />
3. Mengurangi agen yang menyebabkan terjadinya pencoklatan, yang paling umum biasanya yaitu dengan cara mengurangi jumlah karbohidrat mediu, mengurangi atau memindahkan kontak dengan oksigen.<br />
4. Menghambat dengan enzim phenol oksidase, untuk ini dapat digunakan ‘chelating agents’. EDTA telah terbukti dapat menghambat kerja enzim polyphenol oksidase.<br />
5. Pengatur pH rendah, ini dapat dilakukan karena enzim polyphenol oksidase optimalnya pada pH 6.5 dan menurun seirama dengan turunya pH.<br />
6. Penggunaan ruanggelap, karena kerja enzim polyphenol oksidase.<br />
7. Efektifnya dipengaruhi oleh cahaya. Disarankan penggunaan ruanggelap minimal 14 hari setelah penanaman eksplan (Untung Santoso, 2001) .<br />
<br />
Namun pencoklatan tersebut juga tidak semuanya sebagai zat toksik yang dapat penghambat pertumbuhan. Namun dalam jurna Oktavia yang berjudul “Embriogenesis Somatik Langsung Dan Regenerasi Planlet Kopi Arabika (Coffea Arabica) Dari Berbagai Eksplan” bahwa Figueora et al., (2001) pencokelatan pada jaringan yang disebabkan oleh akumulasi senyawa fenolik yang berlebihan, penting untuk proses embriogenesis somatik pada tanaman kopi. Kemungkinan senyawa fenolik berperan sebagai signal untuk induksi diferensiasi. Kemungkinan lain, senyawa ini juga berperan sebagai pengkelat yang menginaktifkan senyawa-senyawa penghambat yang terdapat dalam kultur embriogenik.<br />
Hal ini memerlukan kajian lebih lajut tentang fenomena unik ini karena mungkin akan berguna bagi ilmu-ilmu yang lainya.<br />
<div><br />
</div><div>Gambar pencoklatan</div><div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj7-_AsFxxGbX81b3B1Z87lg2G9GzWEvljD1jo3NBy2J3iMkihwTy3uHr2AUZPk49OYvdNHVaRFII0fD58hRm2J2QBV9fhLe8GMaqWYsk0WpU5MdwFD0ZAhIUmRweyoQalKlHZHreHZ_j4/s1600-h/browning.JPG" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="640" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj7-_AsFxxGbX81b3B1Z87lg2G9GzWEvljD1jo3NBy2J3iMkihwTy3uHr2AUZPk49OYvdNHVaRFII0fD58hRm2J2QBV9fhLe8GMaqWYsk0WpU5MdwFD0ZAhIUmRweyoQalKlHZHreHZ_j4/s640/browning.JPG" width="400" /></a></div><div><br />
</div><div><br />
</div><div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj5V79o9tqcso1y9eSLI3T79CXfwOUrW2PUd2DVjqIoEaP29EUd8kMr0wDYMi2_uqtw3nJe5romszaQQk33HfEhcYInCd6XkBBvtM7gwLJDO-TarqIl3b08rPBUFJKH_pQbLU9IJkCYGEg/s1600-h/pisang+browning.JPG" imageanchor="1" style="margin-left: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="480" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj5V79o9tqcso1y9eSLI3T79CXfwOUrW2PUd2DVjqIoEaP29EUd8kMr0wDYMi2_uqtw3nJe5romszaQQk33HfEhcYInCd6XkBBvtM7gwLJDO-TarqIl3b08rPBUFJKH_pQbLU9IJkCYGEg/s640/pisang+browning.JPG" width="640" /></a></div><div><br />
</div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com4tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-45339447646221436352010-03-05T06:06:00.001-08:002010-03-05T06:06:42.385-08:00Kultur Jaringan KrisanMenenal Tanaman Krisan<br />
Krisan merupakan tanaman bunga hias berupa perdu dengan sebutan lain Seruni atau Bunga emas (Golden Flower) berasal dari dataran Cina. Krisan kuning berasal dari dataran Cina, dikenal dengan Chrysanthenum indicm (kuning), C. morifolium (ungu dan pink) dan C. daisy (bulat, ponpon). Di Jepang abad ke-4 mulai membudidayakan krisan, dan tahun 797 bunga krisan djadikan sebagai simbol kekaisaran Jepang dengan sebutan Queen of The East. Tanaman krisan dari Cina dan Jepang menyebar ke kawasan Eropa dan Perancis tahun 1795. Tahun 1808 Mr. Colvil dari Chelsa mengembangkan 8 varietas krisan di Inggris. Jenis atau varietas krisan modern diduga mulai ditemukan pada abad ke-17. Krisan masuk ke Indonesia pada tahun 1800. Sejak tahun 1940, krisan dikembangkan secara komersial.<br />
<br />
Klasifikasi botani tanaman hias krisan adalah sebagai berikut: Divisi: Spermathophyta<br />
Sub Divisi : Angiospermae Famili : Asteraceae<br />
Genus : Chrysanthemum Species : C. morifolium Ramat, C. indicum, C. daisy dll.<br />
<br />
Jenis dan varietas tanaman krisan di Indonesia umumnya hibrida berasal dari Belanda, Amerika Serikat dan Jepang. Krisan yang ditanam di Indonesia terdiri atas: a) Krisan lokal (krisan kuno) Berasal dari luar negri, tetapi telah lama dan beradaptasi di Indoenesia maka dianggap sebagai krisan lokal. Ciri-cirinya antara lain sifat hidup di hari netral dan siklus hidup antara 7-12 bulan dalam satu kali penanaman. Contoh C. maximum berbunga kuning banyak ditanam di Lembang dan berbunga putih di Cipanas (Cianjur). b) Krisan introduksi (krisan modern atau krisan hibrida) Hidupnya berhari pendek dan bersifat sebagai tanaman annual. Contoh krisan ini adalah C. indicum hybr. Dark Flamingo, C. i.hybr. Dolaroid,C. i. Hybr. Indianapolis (berbunga kuning) Cossa, Clingo, Fleyer (berbunga putih), Alexandra Van Zaal (berbunga merah) dan Pink Pingpong (berbunga pink). c) Krisan produk Indonesia Balai Penelitian Tanaman Hias Cipanas telah melepas varietas krisan buatan Indonesia yaitu varietas Balithi 27.108, 13.97, 27.177, 28.7 dan 30.13A<br />
<br />
Kegunaan tanaman krisan yang utama adalah sebagai bunga hias. Manfaat lain adalah sebagai tumbuhan obat tradisional dan penghasil racun serangga. Sebagai bunga hias, krisan di Indonesia digunakan sebagai: a) Bunga pot Ditandai dengan sosok tanaman kecil, tingginya 20-40 cm, berbunga lebat dan cocok ditanam di pot, polibag atau wadah lainnya. Contoh krisan mini (diameter bunga kecil) ini adalah varietas Lilac Cindy (bunga warna ping keungu-unguan), Pearl Cindy (putih kemerah-merahan), White Cindy (putih dengan tengahnya putih kehijau-hijauan), Applause (kuning cerah), Yellow Mandalay (semuanya dari Belanda).Krisan introduksi berbunga besar banyak ditanam sebagai bunga pot, terdapat 12 varitas krisan pot di Indonesia, yang terbanyak ditanam adalah varietas Delano (ungu), Rage (merah) dan Time (kuning). b) Bunga potong Ditandai dengan sosok bunga berukuran pendek sampai tinggi, mempunyai tangkai bunga panjang, ukuran bervariasi (kecil, menengah dan besar), umumnya ditanam di lapangan dan hasilnya dapat digunakan sebagai bunga potong. Contoh bunga potong amat banyak antara lain Inga, Improved funshine, Brides, Green peas, Great verhagen, Puma, Reagen, Cheetah, Klondike dll. Daerah sentra produsen krisan antara lain: Cipanas, Cisarua, Sukabumi, Lembang (Jawa Barat), Bandungan (Jawa Tengah), Brastagi (Sumatera Utara).<br />
<br />
Tanaman krisan membutuhkan air yang memadai, tetapi tidak tahan terhadap terpaan air hujan. Oleh karena itu untuk daerah yang curah hujannya tinggi, penanaman dilakukan di dalam bangunan rumah plastik. 2) Untuk pembungaan membutuhkan cahaya yang lebih lama yaitu dengan bantuan cahaya dari lampu TL dan lampu pijar. Penambahan penyinaran yang paling baik adalah tengah malam antara jam 22.30–01.00 dengan lampu 150 watt untuk areal 9 m2 dan lampu dipasang setinggi 1,5 m dari permukaan tanah. Periode pemasangan lampu dilakukan sampai fase vegetatif (2-8 minggu) untuk mendorong pembentukan bunga. 3) Suhu udara terbaik untukdaerah tropis seperti Indonesia adalah antara 20-26 derajat C. Toleran suhu udara untuk tetap tumbuh adalah 17-30 derajat C. 4) Tanaman krisan membutuhkan kelembaban yang tinggi untuk awal pembentukan akar bibit, setek diperlukan 90-95%. Tanaman muda sampai dewasa antara 70- 80%, diimbangi dengan sirkulasi udara yang memadai. 5) Kadar CO2 di alam sekitar 3000 ppm. Kadar CO2 yang ideal untuk memacu fotosistesa antara 600-900 ppm. Pada pembudidayaan tanaman krisan dalam bangunan tertutup, seperti rumah plastik, greenhouse, dapat ditambahkan CO2, hingga mencapai kadar yang dianjurkan. <br />
<br />
Perbanyak Dengan Kultur Jaringan<br />
Kultur jaringan merupakan suatu metode untuk mengisolasi bagian dari tanaman seperti protoplasma, sel, sekelompok sel, jaringan dan organ , serta menumbuhkannya dalam keadaan aseptik, sehingga bagian-bagian tersebut dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman utuh kembali.<br />
<br />
Tujuan kegiatan kultur jaringan adalah perbanyakan masal tanaman yang biasanya sangat lambat dengan metoda konvensional dalam jumlah yang besar dalam waktu yang singkat, selain itu diperoleh tanaman yang bebas virus, membantu pemulian tanaman untuk mempercepat pencapaian tujuan penelitian pada tanaman yang biasa diperbanyak secara vegetatif<br />
<br />
Langkah-langkah Kultur Jaringan Pada Krisan<br />
Pengambilan eksplan atau sumber eksplan krisan berupa pucuk dan nodus berasal dari tanaman induk krisan di rumah kaca perbenihan Balithi Segunung dan planlet di laboratorium kultur jaringan Balithi Segunung. Pembuatan Media MS Media yang digunakan untuk tanaman krisan di Balithi Segunung adalah media induksi tunas dan media perbanyakan. Komposisi media yang digunakan untuk induksi tunas adalah½ MS + 0.5 IAA komposisi media yang digunakan untuk perbanyakan adalah½ MS + 0.1 IAA Menyiapkan Eksplan Dalam perbanyakan tanaman secara kultur jaringan eksplan merupakan factor penting penentu keberhasilan. Hal-hal yang harus dipertimbangkan dalam pemilihan sebagai bahan kultur adalah jenis tanaman, bagian tanaman yang digunakan, morfologi permukaan, lingkungan tumbuhnya, kondisi tanaman, dan musim waktu mengambilnya. Umumnya bagian tanaman yang digunakan sebagai eksplan adalah jaringan muda yang sedang aktif karena mempunyai regenerasi yang tinggi.<br />
<br />
Eksplan yang digunakan pada tanaman krisan adalah nodus karena untuk menginduks tunas aksilar. Kultur Aseptik Krisan Sterilisasi Sterilisasi merupakan kegiatan untuk menghilangkan kontaminan organisme yang menempel di permukaan eksplan. Tujuan utama tahap ini adalah mengusahakan kultur yang aseptik dan aksenik. Aksenik berarti bebas dari mikroorganisme yang tidak diinginkan, sedangkan aseptic berarti bebas dari mikroorganisme.<br />
<br />
Pemilihan Dan Penyipan Tanaman Induk<br />
Sebelum melakukan kultur jaringan untuk suatu tanaman kegiatan pertama harus dilakukan adalah memilih tanaman induk yang hendak diperbanya. Seleksi untuk mendapatkan klon-klon yang dikehendaki. Klon yang mempunyai sifat beda, unik, stabil dan seragam kemudian dijadikan tanaman induk tunggal dan sebagai tanaman donor (bahan eksplan) untuk perbanyakan secara in vitro. Planlet (tanaman) hasil dari perbanyakan in vitro kemudian diaklimatisasi di rumah kaca. Setelah tanaman beradaptasi dengan lingkungan rumah kaca kemudian diperbanyak untuk keperluan tanaman induk yang akan menghasilkan tanaman produksi.<br />
Penting sekali untuk lingkungan tanamn induk tersebut harus heginis untuk mendapatkan eksplan yang berkualitas dan lebih bersih untuk pembiakan in-vintro.<br />
Pengerjaannya dilakukan dalam ruang laminar agar terhindar dari kontaminan. Penanamannya dikelompokkan berdasarkan nomor ruas. Setiap botol diisi 5 eksplan dan diulang empat kali. Botol kultur selanjutnya diinkubasi dalam ruang pertumbuhan dengan pencahayaan 16 jam di bawah lampu fluoresen 40 watt, suhu 24-26 oC, dan kelembapan 60-80% hingga eksplan tumbuh menjadi planlet (tanaman hasil kultur jaringan yang telah lengkap memiliki bagian-bagian tanaman yang meliputi akar, batang, dan daun)<br />
<br />
Cara Sterilisasi Untuk Tanaman Krisan<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Mengambil eksplan yang telah diseleksi berdasarkan ketahanan vigor, hama penyakit, dan jumlah daun 4 - 5 helai atau 3 - 4 nodus.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Memotong eksplan per nodus dengan mengurangi atau memotong sebagian helai daun.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Eksplan direndam dalam larutan Benlatte dan Bactomicyn (fungisida dan bakterisida), masing-masing sebanyak 1 g/300 ml aquades sambil dikocok-jocok selama 30 menit.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Membilas eksplan dengan air aquadest sebanyak 4 - 5 kali.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Selanjutnya eksplan dibawa ke laminar.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Eksplan dimasukkan ke dalam larutan tween 2 tetes/100 ml aquades sambil dikocok-kocok selama 5 menit.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Eksplan dimasukkan ke dalam larutan Chlorox 0.5 % selama 5 menit sambil dikocok-kocok.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Selanjutnya eksplan dimasukkan ke dalam larutan Chlorox 1 % selama 3 menit sambil dikocok-kocok.<br />
•<span class="Apple-tab-span" style="white-space: pre;"> </span>Eksplan dibilas dengan air destilasi sebanyak 5 - 6 kali.<br />
<br />
Penanaman Eksplan Kegiatan dan Media Tanam<br />
Penanaman eksplan ke dalam botol kultur disebut dengan inokulasi. Kegiatan ini dilakukan setelah eksplan disterilisasi, diawali dengan memotong bagian permukaan eksplan. Selanjutnya eksplan berupa nodus ditanam sebanyak dua buah dalam media ½ MS + IAA 0.5 mg/l, sedangkan eksplan berupa pucuk tidak perlu ditanam, cukup diletakkan saja pada media yang sama sebanyak 3 buah. Sebelum ditutup dengan plastik wrap, plastik transparan, dan karet, botol media yang telah ditanami terlebih dahulu dipanaskan di atas api bunsen. Selanjutnya botol diberi label jenis tanaman dan tanggal penanaman. Eksplan yang telah dikulturkan dibawa ke ruang inkubasi dan dibiarkan sampai tumbuh.<br />
<br />
Multiplikasi<br />
Cutting atau Multipikasi bertujuan untuk memperbanyak propagul sedangkan, Sub kultur adalah usaha untuk menggantikan media dalam kultur jaringan dengan media yang baru, sehingga kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan kalus dapat terpenuhi. Berikut ini adalah uraian tentang teknik pelaksaan sub kultur pada media padat. Dari media pertama, kultur dipindahkan ke media regerasi selama sekitar tiga minggu. Setelah itu, apabila kita bertujuan untuk memperbanyak propagul atau multifikasi,maka kita lakukan pemindahan media baru dan apabila tanamannya berbatang maka kita lakukan stek/ cutting contohnya pada tanaman krisan kita perbanyak dengan cara memotong perbuku. Atau per dua buku tergantung titik tumbuh daun, yang akan menjadi cabang baru.<br />
<br />
Namun biasanya cuttig krisan dilakukan stelah tanamn tumbuh sempurna dan besar. Hal ini untuk memeudahkan perbanyakan, sehingga dapat memeprbanyak tanpa batas.<br />
<br />
Tunas-tunas hasil perbanyakan di laboratorium kultur jaringan diseleksi untuk memperoleh tunas yang pertumbuhannya sehat, vigor baik, dan tidak menunjukkan gejala penyimpangan. Tunas terpilih kemudian dikeluarkan dari botol secara hati-hati dengan menggunakan pisau skalpel, kemudian dipotong tiap ruas/buku dari ruas 1 sampai 4. Pemotongan dilakukan di dalam petridis menggunakan pisau kultur. Bagian tanaman yang digunakan adalah pucuk atau ruas 1, 2, 3, dan 4. dan stelah itu dimasukan kedalam media sub kultur dengan media ½ MS + 0.5 IAA.Pembentukan akar umumnya dimulai dengan pemindahan indol acetic acid (IAA) yang diproduksi pucuk tanaman ke bagian batang yang luka untuk menstimulasi pembentukan akar (Brenner et al. 1987).<br />
<br />
Setelah pomotongan, umumnya setek tidak sensitif terhadap hormon. Pada fase ini terjadi dediferensiasi, sel-sel menjadi kompeten dan responsif terhadap hormon. Setelah itu sel-sel aktif membelah (bersifat meristematik) diikuti dengan pembentukan primordia akar, pembentukan akar hingga akar tumbuh dan berkembang (De Klerk et al. 1999). Auksin umumnya berperan penting dalam inisiasi pembentukan akar. Peran auksin akan optimal bila faktor lingkungan juga optimal.<br />
<br />
Aklimatisasi<br />
Aklimatisasi merupakan kegiatan akhir teknik kultur jaringan. Aklimatisasi adalah proses pemindahan planlet dari lingkungan yang terkontrol ke kondisi lingkungan tak terkendali, baik suhu, cahaya, dan kelembaban. Aklimatisasi dilakukan untuk mengadaptasikan tanaman hasil kultur jaringan terhadap lingkungan baru sebelum ditanam dan dijadikan tanaman induk untuk produksi dan untuk mengetahui kemampuan adaptasi tanaman dalam lingkungan tumbuh yang kurang aseptik.<br />
<br />
Perubahan kondisi lingkungan yang drastis, dari lingkungan terkontrol ke tidak terkontrol, dari suhu relatif stabil ke suhu lingkungan yang fluktuatif, dari kelembapan tinggi ke rendah dan fluktuatif, dan dari cahaya rendah ke cahaya tinggi pada umumnya menyebabkan tanaman mudah mengalami cekaman atau stres, kehilangan air, layu, dan mati Oleh karena itu, proses aklimatisasi perlu dilakukan secara bertahap, seperti yang diterapkan Winarto (2002) pada anyelir. Aklimatisasi akan membantu tanaman beradaptasi terhadap perubahan kondisi lingkungan seperti suhu, kelembapan, dan intensitas cahaya.<br />
Metode aklimatisasi dibagi menjadi 2, yaitu metode langsung (direct) dan metode tidak langsung (indirect).<br />
Metode langsung:<br />
1.Menyiapkan planlet dalam botol yang akan diaklimatisasi dan mengeluarkan planlet secara hati-hati dari dalam botol.<br />
2.Membersihkan akar tanaman dari agar-agar yang masih melekat dengan air.<br />
3.Merendam akar tanaman dalam larutan fungisida dan bakterisida selama 5 menit.<br />
4.Menanam tanaman pada bak media arang sekam yang telah dibasahi.<br />
5.Tutup bak dengan plastik transparan selam 1 - 2 minggu.<br />
6.Setelah 1 -2 minggu plastik dibuka dan tanaman dibiarkan tumbuh dan berkembang dalam bak aklimatisasi hingga minggu ketiga sampai keempat.<br />
7.Selanjutnya tanaman dipindahkan ke dalam polibag-polibag kecil sampai siap untuk di tanam di lapang.<br />
<br />
Metode tidak langsung:<br />
1.Menyiapkan planlet dalam botol yang akan diaklimatisasi dan mengeluarkan planlet secara hati-hati dari dalam botol<br />
2.Memotong tanaman tepat pada bagian bawah nodus ketiga kemudian merendamnya dalam larutan fungisida dan bakterisida selama 5 menit.<br />
3.Menanam tanaman pada bak media arang sekam yang telah dibasahi.<br />
4.Tutup bak dengan plastik transparan selam 1 - 2 minggu.<br />
<br />
Aklimatisasi Planlet di Rumah Kaca Aklimatisasi merupakan tahap penting dalam proses kultur jaringan. Tahap ini sering kali menjadi titik kritis dalam aplikasi teknik kultur jaringan. Aklimatisasi diperlukan karena tanaman hasil kultur jaringan umumnya memiliki lapisan lilin tipis dan belum berkembang dengan baik, sel-sel dalam palisade belum berkembang maksimal, jaringan pembuluh dari akar ke pucuk kurang berkembang, dan stomata sering kali tidak berfungsi, yaitu tidak dapat menutup pada saat penguapan tinggi.adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com4tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-23453197660167697252010-03-05T05:58:00.000-08:002010-03-05T06:07:23.396-08:00Laboratorium Kultur JaringanLaboratorium merupakan faktor terpenting dalam kultur jaringan. Menentukan lokasi yang tepat untuk laboratorium kultur jaringan, perlu memperhatikan beberapa aspek. Hal ini erat kaitannya dengan sifat dan ciri kultur jaringan yang mengharuskan kondisi aseptik dan lingkungan terkontrol. Laboratorium kultur jaringan sebaiknya tidak berlokasi di daerah berdebu, contohnya di dekat pabrik semen atau berasap kendaraan bermotor seperti tempat parkir mobil, terminal, atau statsiun kereta api. Laboratorium sebaiknya juga tidak berlokasi di daerah yang berangin kencang, terlalu kering ( langka sumber air ), atau dekat dengan pembuangan sampah. Di tempat-tempat tersebut pengontrolan kontaminasi sulit dilakukan. Lokasi yang baik untuk laboratorium harus di lingkungan yang bersih, bebas polusi, tanpa keterbatasan air, dan yang terpenting diperlengkapi dengan prasarana transportasi utilities ( air, gas, dan listrik ) yang memadai. <br />
Ukuran dan jumlah ruangan yang diperlukan untuk sebuah laboratorium kultur jaringan dapat bervariasi, tergantung pada kebutuhannya. Beberapa hal yang sering menjadi bahan pertimbangan dalam merancang sebuah laboratorim kultur jaringan adalah besarnya kapasitas produksi planlet yang dikehendaki,besarnya modal awal yang ada, serta skala usaha yang dijalankan untuk komersial atau sekedar pemenuhan hobi memperbanyak tanaman. <br />
Fasilitas laboratorium kultur jaringan dibagi menjadi beberapa bagian yang fungsinya satu dengan yang lainnya berbeda dan persyaratannya pun berbeda pula. Laboratorium kultur jaringan harus dirancang sedemikian rupa, karena ada bagian–bagian atau ruangan harus dalam keadaan steril atau bebas mikroba. <br />
Tujuan yang utama dari kultur jaringan yaitu untuk membiakkan bagian tanaman dalam ukuran yang sekecil – kecilnya seperti sel, jaringan dan organ. Oleh karena itu, laboratorium kultur jaringan tanaman harus selalu mengutamakan dan memperhatikan tingkat sterilitas dari ruangan- ruangannya, sehingga terbebas dari kontaminasi dan mikroba yang tidak dikehendaki. Ruang-ruang dalam laboratorium kultur jaringan dikelompokkan menurut macam kegiatan yang ada di dalamnya, yaitu :<br />
<br />
A.Ruang Tidak Steril <br />
1.Ruang Tamu Laboratorium kultur jaringan tanaman harus dilengkapi dengan ruang tamu, karena biasanya laboratorium kultur jaringan tanaman selalu didatangi oleh tamu. Ruang tamu ini sebaiknya berada di bagian paling depan dan berhubungan langsung dengan ruang administrasi.<br />
2.Ruang Administrasi Dalam laboratorium kultur jaringan tanaman ruang administrasi digunakan sebagai tempat untuk memcatat surat tentang pembelian alat – alat laboratorium jika ada yang rusak.<br />
3.Ruang Staf Laboratorium kultur jaringan tanaman membutuhkan staf peneliti dalam jumlah banyak. Tujuannya agar dapat diadakan pembagian kerja sesuai dengan spesialisasinya maisng-masing. Di dalam ruang staf dapat pula dilaksanakan diskusi antar staf pada waktu berkumpul bersama. Di samping itu ruang staf ini dapat berfunsi sebagai tempat istirahat setelah seharian bekerja dengan tekun di dalam ruangan laboratorium.<br />
4.Kamar Mandi / Wc Laboratorium kultur jaringan tanaman harus selalu dalam suasana bersih untuk menghindari kontaminasi oleh mikroba. Bila pekerja akan memasuki ruang inokulasi, tubuh dan pakaian harus bersih, tidak berkeringat, dan tidak berdebu. Untuk inilah maka kamar mandi dan wc perlu disediakan dengan syarat harus selalu dalam keadaan bersih.<br />
5.Ruang Ganti Pakaian Untuk menghindari timbulnya kontaminasi oleh mikroba, maka karyawan di dalam laboratorium kultur jaringan tanaman harus memakai pakaian yang bersih, dalam arti baru di cuci. Oleh karena itu di dalam laboratorium kultur jaringan tanaman harus disediakan ruang untuk ganti pakaian. <br />
6.Ruang Penyimpanan Bahan Kimia Komponen bahan kimia penyusun media kultur jaringan tanaman sangat banyak macam jenisnya. Oleh karena itu, penyimpanannya memerlukan pengaturan khusus supaya mudah mencarinya. Penyimpanan yang tidak teratur akan memperlambat pekerjaan. Maka diperlukan tempat penyimpanan bahan kimia yang dibuat dari kayu maupun kaca.<br />
7.Ruang Penimbangan Dan Sterilisasi Dalam membuat larutan kita harus terlebih dahulu menimbang bahannya. Alat yang digunakan untuk menimbang sering kita sebut timbangan analitik digunakan dalam ruangan tersendiri yang bentuk dan konsentrasinya dibuat sedemikian rupa sehingga ruangan ini tidak terpengaruh oleh getaran-getaran dan hembusan angin yang dapat mempengaruhi hasil penimbangan. <br />
<br />
B.Ruang Tidak Mutlak Steril <br />
1.Ruang Planlet Dalam ruangan ini menggunakan alat pendingin (AC), maka temperatur ruangan dapat mencapai sekitar 25oC sehingga ideal bagi tumbuhan planlet. Botol-botol yang berisi planlet jumlahnya dapat mencapai ratusan bahkan ribuan. Oleh karena itu dalam ruangan ini harus disediakan rak-rak alumunium yang dasarnya berlobang-lobang untuk meletakkan botol-botol tersebut secara teraatur dan rapi.<br />
2.Ruang Inkubator Eksplan yang sudah ditanam dalam media kultur jaringan perlu dipantau pertumbuhannya setiap hari. Untuk pemantauan ini memerlukan ruangan yang khusus yang keadaannya lebih steril daripada ruangan planlet, yaitu ruangan Inkubator. Ruangan inkubator harus memiliki suhu kurang lebih 25oC dan harus dilengkapi dengan lampu-lampu neon, karena eksplan yang ditumbuhkan dalam ruangan inkubasi membutuhkan temperatur dan cahaya diatur dan disesuaikan jenis eksplannya. Untuk menghemat tempat, maka dalam ruang inkubator ini dapat dilengkapi dengan rak-rak dari kayu dengan dinding rapat tetapi alasnya berlubang-lubang supaya aerasi dapat berjalan dengan baik. Setiap kotak pada rak ini dilengkapi dengan da-light neon lamp 20 watt yang jaraknya 40-60 cm diatas permukaan tutup botol eksplan.<br />
<br />
C.Ruang Mutlak Steril <br />
atu-satunya ruangan di dalamlaboratorium kultur jaringan tanaman yang mutlak steril adalah ruangan penanaman (Inokulasi). Ruangan ini biasanya sengaja dibuat dengan ukuran yang tidak sangat besar. Tujuannya adalah agar pelaksanaan sterilisasi ruangannya tidak membutuhkan waktu yang lama dan tidak mengalami kesulitan. Dinding ruangan penanaman (Inokulasi) dilengkapi dengan porselin, sehingga sterilisasi mudah dilakukan . alat yang digunakan untuk melakukan penanaman (Inokulasi) adalah Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) yang biasanya diletakkan pada salah satu sisi ruangan. Letak barang-barang di dalam ruangan ini harus diatur secara rapi dan teratur agar tidak mengganggu pelaksanaan sterilisasi ruangan. Disebelah kanan Laminar Air Flow Cabinet sebaiknya terdapat meja porselin. Meja ini digunakan untuk meletakkan alat-alat yang diperlukan sebelum melakukan penanaman. Alat-alat seperti botol-botol media, skalpel, pinset, petridish, lampu spirus dan lain sebagainya diletakka di atas meja tersebut dan disemprot dengan alkohol 96% dahulu sebelum masuk ke dalam Laminar Air Flow Cabinet. Aerasol sterilisation dapat juga dilakukan dengan menggunakan lampu ultra violet (UV lamp). Lampu ini digunakan untuk sterilisasi udara, sinarnya dipilih yang kuat sesuai dengan volume ruangan lampu UV ini harus dinyalakan pada saat ruangan tidak digunakan. Dan harus dimatikan ketika akan melakukan penanaman. Dalam semua ruangan terdapat beberapa peralatan yang harus ada dalam setiap ruangan laboratorium kultur jaringan. Setidaknya harus ada peralatan sebagai berikut: <br />
1.Ruang Inokulasi<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgAqWQQEnssA9dSjQaWl1nFvglMyioqxOIC4iGPOwi5SXuY4t6ThTXQiIHowEsjmJ_LeVLKeiWF46D_duVmLrHIfZeERqfkl0LWJL_ublLXG4ZmldAWqOzXX47OZIAfm6-mWBLsEtKfYp4/s1600-h/Picture1.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="640" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgAqWQQEnssA9dSjQaWl1nFvglMyioqxOIC4iGPOwi5SXuY4t6ThTXQiIHowEsjmJ_LeVLKeiWF46D_duVmLrHIfZeERqfkl0LWJL_ublLXG4ZmldAWqOzXX47OZIAfm6-mWBLsEtKfYp4/s640/Picture1.jpg" width="470" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
2.Ruang Pertumbuhan<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhaXFH8bq4BEQ7TBGxciutSINDu0jehgrlFZSZ5kwEfnCgNPEmMs0RONso1AvjXZfbOMRweX3PiVxC2iWhewtBJLvMelcoFQxGSg96Pn6T0QjvKoExgDLV1kBsYdZ7E_-XmwO_4AXeVqkY/s1600-h/pertumbuhan.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="449" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhaXFH8bq4BEQ7TBGxciutSINDu0jehgrlFZSZ5kwEfnCgNPEmMs0RONso1AvjXZfbOMRweX3PiVxC2iWhewtBJLvMelcoFQxGSg96Pn6T0QjvKoExgDLV1kBsYdZ7E_-XmwO_4AXeVqkY/s640/pertumbuhan.jpg" width="640" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
3.Ruang Persiapan<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgs6wFkbX-NFz2-CwwADgka6fwi8jAlNN2-TQEyB4yI3yK7PFm322TZc-PyRKZncDRsh9pHDG3rUe70ryazVE0jYCy6g8dUZ5CQBCTJiCUo8YnsjP9l9iQ6nJXla0dbjXFzTXM41K49KNM/s1600-h/persiapan.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="640" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgs6wFkbX-NFz2-CwwADgka6fwi8jAlNN2-TQEyB4yI3yK7PFm322TZc-PyRKZncDRsh9pHDG3rUe70ryazVE0jYCy6g8dUZ5CQBCTJiCUo8YnsjP9l9iQ6nJXla0dbjXFzTXM41K49KNM/s640/persiapan.jpg" width="604" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
4.Ruang Timbang<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgi7o7l0rCMJJ_ZeP3CJzW9v4yPIq3m4-4vMqQd9CScjf0l6bJpw4h69O77XZvOU8AZhHtAeozeLPNAtybZEKxzooTGI6DAK4c8aiZa6jD0STNGCW8MQ3p8_AhqU1sV7A80k2yFcmD9jw0/s1600-h/pertimbangan.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="308" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgi7o7l0rCMJJ_ZeP3CJzW9v4yPIq3m4-4vMqQd9CScjf0l6bJpw4h69O77XZvOU8AZhHtAeozeLPNAtybZEKxzooTGI6DAK4c8aiZa6jD0STNGCW8MQ3p8_AhqU1sV7A80k2yFcmD9jw0/s640/pertimbangan.jpg" width="640" /></a></div><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
5.Ruang Dapur<br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg7lKZ6an-8eBpSbfobuk4m7hiXDvxP9reDga7jYSqi7pQr1eox38DgYebRpwSRkWchX6qpvbgbQH1OpD7W6UPaIx6bLGpWmUdPKouGwdN-wvf7iCnMcRRb5BzpPd8N-Jwqwy08wT54We4/s1600-h/dapur.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="280" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEg7lKZ6an-8eBpSbfobuk4m7hiXDvxP9reDga7jYSqi7pQr1eox38DgYebRpwSRkWchX6qpvbgbQH1OpD7W6UPaIx6bLGpWmUdPKouGwdN-wvf7iCnMcRRb5BzpPd8N-Jwqwy08wT54We4/s640/dapur.jpg" width="640" /></a></div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com2tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-51849076234838296762010-03-02T20:39:00.001-08:002010-03-02T20:39:01.089-08:00Kultur Jaringan<meta content="text/html; charset=utf-8" http-equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 12" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 12" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_themedata.thmx" rel="themeData"></link><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_colorschememapping.xml" rel="colorSchemeMapping"></link> <m:smallfrac m:val="off"> <m:dispdef> <m:lmargin m:val="0"> <m:rmargin m:val="0"> <m:defjc m:val="centerGroup"> <m:wrapindent m:val="1440"> <m:intlim m:val="subSup"> <m:narylim m:val="undOvr"> </m:narylim></m:intlim> </m:wrapindent><style>
<!--
/* Font Definitions */
@font-face
{font-family:"Cambria Math";
panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4;
mso-font-charset:1;
mso-generic-font-family:roman;
mso-font-format:other;
mso-font-pitch:variable;
mso-font-signature:0 0 0 0 0 0;}
/* Style Definitions */
p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal
{mso-style-unhide:no;
mso-style-qformat:yes;
mso-style-parent:"";
margin:0in;
margin-bottom:.0001pt;
mso-pagination:widow-orphan;
font-size:12.0pt;
font-family:"Times New Roman","serif";
mso-fareast-font-family:"Times New Roman";}
.MsoChpDefault
{mso-style-type:export-only;
mso-default-props:yes;
mso-ascii-font-family:Calibri;
mso-ascii-theme-font:minor-latin;
mso-fareast-font-family:Calibri;
mso-fareast-theme-font:minor-latin;
mso-hansi-font-family:Calibri;
mso-hansi-theme-font:minor-latin;
mso-bidi-font-family:"Times New Roman";
mso-bidi-theme-font:minor-bidi;}
.MsoPapDefault
{mso-style-type:export-only;
margin-bottom:10.0pt;
line-height:115%;}
@page Section1
{size:8.5in 11.0in;
margin:1.0in 1.0in 1.0in 1.0in;
mso-header-margin:.5in;
mso-footer-margin:.5in;
mso-paper-source:0;}
div.Section1
{page:Section1;}
/* List Definitions */
@list l0
{mso-list-id:513374808;
mso-list-type:hybrid;
mso-list-template-ids:-122134824 1647090118 67698713 -1935494186 67698703 67698713 67698715 67698703 67698713 67698715;}
@list l0:level1
{mso-level-number-format:alpha-lower;
mso-level-tab-stop:.8in;
mso-level-number-position:left;
margin-left:.85in;
text-indent:-.1in;}
@list l0:level2
{mso-level-number-format:alpha-lower;
mso-level-tab-stop:1.0in;
mso-level-number-position:left;
text-indent:-.25in;}
@list l0:level3
{mso-level-number-format:bullet;
mso-level-text:;
mso-level-tab-stop:117.0pt;
mso-level-number-position:left;
margin-left:117.0pt;
text-indent:-.25in;
font-family:Symbol;
mso-bidi-font-family:Symbol;}
@list l0:level4
{mso-level-tab-stop:2.0in;
mso-level-number-position:left;
text-indent:-.25in;}
@list l0:level5
{mso-level-number-format:alpha-lower;
mso-level-tab-stop:2.5in;
mso-level-number-position:left;
text-indent:-.25in;}
@list l0:level6
{mso-level-number-format:roman-lower;
mso-level-tab-stop:3.0in;
mso-level-number-position:right;
text-indent:-9.0pt;}
@list l0:level7
{mso-level-tab-stop:3.5in;
mso-level-number-position:left;
text-indent:-.25in;}
@list l0:level8
{mso-level-number-format:alpha-lower;
mso-level-tab-stop:4.0in;
mso-level-number-position:left;
text-indent:-.25in;}
@list l0:level9
{mso-level-number-format:roman-lower;
mso-level-tab-stop:4.5in;
mso-level-number-position:right;
text-indent:-9.0pt;}
ol
{margin-bottom:0in;}
ul
{margin-bottom:0in;}
-->
</style> </m:defjc></m:rmargin></m:lmargin></m:dispdef></m:smallfrac><br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Kultur jaringan tanaman adalah suatu metode atau teknik mengisolasi bagian tanaman (protoplasma, sel, jaringan, dan organ) dan menumbuhkannya pada media buatan dalam kondisi aseptik di dalam ruang yang terkontrol sehingga bagian-bagian tanaman tersebut dapat tumbuh dan berkembang menjadi tanaman lengkap. Penggunaan teknik kultur jaringan pada awalnya hanya untuk membuktikan teori “totipotensi” (<i>“total genetic potential”</i>) yang dikemukakan oleh Schleiden dan Schwann (1838) yang menyatakan bahwa sel tanaman sebagai unit terkecil dapat tumbuh dan berkembang apabila dipelihara dalam kondisi yang sesuai. Saat ini teknik kultur jaringan digunakan bukan hanya sebagai sarana untuk mempelajari aspek-aspek fisiologi dan biokimia tanaman saja, tetapi sudah berkembang menjadi metoda untuk berbagai tujuan seperti:</span><span style="font-family: "Arial","sans-serif";"><o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-align: justify; text-indent: -9pt;"><span lang="IN" style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Mikropropagasi (perbanyakan tanaman secara mikro)<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Teknik kultur jaringan telah digunakan dalam membantu produksi tanaman dalam skala besar melalui mikropropagasi atau perbanyakan klonal dari berbagai jenis tanaman. Jaringan tanaman dalam jumlah yang sedikit dapat menghasilkan ratusan atau ribuan tanaman secara terus menerus. Teknik ini telah digunakan dalam skala industri di berbagai negara untuk memproduksi secara komersial berbagai jenis tanaman seperti tanaman hias (anggrek, bunga potong, dll.), tanaman buah-buahan (seperti pisang), tanaman industri dan kehutanan (kopi, jati, dll). Dengan menggunakan metoda kultur jaringan, jutaan tanaman dengan sifat genetis yang sama dapat diperoleh hanya dengan berasal dari satu mata tunas. Oleh karena itu metoda ini menjadi salah satu alternatif dalam perbanyakan tanaman secara vegetatif.<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-align: justify; text-indent: -9pt;"><span lang="IN" style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Perbaikan tanaman<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Dalam usaha perbaikan tanaman melalui metoda pemuliaan secara konvensional, untuk mendapatkan galur murni diperlukan waktu enam sampai tujuh generasi hasil penyerbukan sendiri maupun persilangan. Melalui teknik kultur jaringan, dapat diperoleh tanaman homosigot dalam waktu singkat dengan cara memproduksi tanaman haploid melalui kultur polen, antera atau ovari yang diikuti dengan penggandaan kromosom. Tanaman homosigot ini dapat digunakan sebagai bahan pemuliaan tanaman dalam rangka perbaikan sifat tanaman.<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-align: justify; text-indent: -9pt;"><span lang="IN" style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Produksi tanaman yang bebas penyakit (virus)<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Teknologi kultur jaringan telah memberikan kontribusinya dalam mendapatkan tanaman yang bebas dari virus. Pada tanaman yang telah terinfeksi virus, sel-sel pada tunas ujung (meristem) merupakan daerah yang tidak terinfeksi virus. Dengan cara mengkulturkan bagian meristem akan diperoleh tanaman yang bebas virus. <o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-align: justify; text-indent: -9pt;"><span lang="IN" style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Transformasi genetik<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Teknik kultur jaringan telah menjadi bagian penting dalam membantu keberhasilan rekayasa genetika tanaman (transfer gen). Sebagai contoh transfer gen bakteri (seperti gen <i>cry</i> dari <i>Bacillus thuringiensis</i>) ke dalam sel tanaman akan terekspresi setelah regenerasi tanaman transgeniknya tercapai.<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-align: justify; text-indent: -9pt;"><span lang="IN" style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Produksi senyawa metabolit sekunder<o:p></o:p></span></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Kultur sel tanaman juga dapat digunakan untuk memproduksi senyawa biokimia (metabolit sekunder) seperti alkaloid, terpenoid, phenyl propanoid dll. Teknologi ini sekarang sudah tersedia dalam skala industri. Sebagai contoh produksi secara komersial senyawa “shikonin” dari kultur sel <i>Lithospermum erythrorhizon.</i></span><i><span style="font-family: "Arial","sans-serif";"><o:p></o:p></span></i></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><br />
</div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 0in; text-indent: -0.25in;"><b><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">b.<span style="font-family: "Times New Roman"; font-size-adjust: none; font-size: 7pt; font-stretch: normal; font-style: normal; font-variant: normal; font-weight: normal; line-height: normal;"> </span></span></b><b><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Sejarah kultur jaringan.<o:p></o:p></span></b></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;"><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";">Penggunaan teknik kultur jaringan dimulai oleh <i>Gottlieb Haberlandt </i>pada tahun 1902 dalam usahanya mengkulturkan sel-sel rambut dari jaringan mesofil daun tanaman monokotil. Tetapi usahanya gagal karena sel-sel tersebut tidak mengalami pembelahan, diduga kegagalan itu karena tidak digunakannya zat pengatur tumbuh yang diperlukan untuk pembelahan sel, proliferasi dan induksi embrio. Pada tahun 1904, <i>Hannig</i> melakukan penanaman embrio yang diisolasi dari beberapa tanaman <i>crucifers</i>. Tahun 1922, secara terpisah Knudson dan Robbin masing-masing melakukan usaha penanaman benih anggrek dan kultur ujung akar. Setelah tahun 1920-an, penemuan dan perkembangan teknik kultur jaringan terus berlanjut. Berikut tabel yang menunjukkan sejarah perkembangan bidang kultur jaringan tanaman yang diadaptasi dari berbagai sumber.</span><br />
<br />
<br />
<meta content="text/html; charset=utf-8" http-equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 12" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 12" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_themedata.thmx" rel="themeData"></link><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Caga%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtmlclip1%5C01%5Cclip_colorschememapping.xml" rel="colorSchemeMapping"></link><!--[if gte mso 9]><xml> <w:WordDocument> <w:View>Normal</w:View> <w:Zoom>0</w:Zoom> <w:TrackMoves/> <w:TrackFormatting/> <w:PunctuationKerning/> <w:ValidateAgainstSchemas/> <w:SaveIfXMLInvalid>false</w:SaveIfXMLInvalid> <w:IgnoreMixedContent>false</w:IgnoreMixedContent> <w:AlwaysShowPlaceholderText>false</w:AlwaysShowPlaceholderText> <w:DoNotPromoteQF/> <w:LidThemeOther>EN-US</w:LidThemeOther> <w:LidThemeAsian>X-NONE</w:LidThemeAsian> <w:LidThemeComplexScript>X-NONE</w:LidThemeComplexScript> <w:Compatibility> <w:BreakWrappedTables/> <w:SnapToGridInCell/> <w:WrapTextWithPunct/> <w:UseAsianBreakRules/> <w:DontGrowAutofit/> <w:SplitPgBreakAndParaMark/> <w:DontVertAlignCellWithSp/> <w:DontBreakConstrainedForcedTables/> <w:DontVertAlignInTxbx/> <w:Word11KerningPairs/> <w:CachedColBalance/> </w:Compatibility> <w:BrowserLevel>MicrosoftInternetExplorer4</w:BrowserLevel> <m:mathPr> <m:mathFont m:val="Cambria Math"/> <m:brkBin m:val="before"/> <m:brkBinSub m:val="--> <m:smallfrac m:val="off"> <m:dispdef> <m:lmargin m:val="0"> <m:rmargin m:val="0"> <m:defjc m:val="centerGroup"> <m:wrapindent m:val="1440"> <m:intlim m:val="subSup"> <m:narylim m:val="undOvr"> </m:narylim></m:intlim> </m:wrapindent><!--[endif]--><!--[if gte mso 9]><xml> <w:LatentStyles DefLockedState="false" DefUnhideWhenUsed="true"
DefSemiHidden="true" DefQFormat="false" DefPriority="99"
LatentStyleCount="267"> <w:LsdException Locked="false" Priority="0" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Normal"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="heading 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 7"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 8"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="9" QFormat="true" Name="heading 9"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 7"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 8"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" Name="toc 9"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="35" QFormat="true" Name="caption"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="10" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Title"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="1" Name="Default Paragraph Font"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="11" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Subtitle"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="22" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Strong"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="20" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Emphasis"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="59" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Table Grid"/> <w:LsdException Locked="false" UnhideWhenUsed="false" Name="Placeholder Text"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="1" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="No Spacing"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" UnhideWhenUsed="false" Name="Revision"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="34" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="List Paragraph"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="29" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Quote"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="30" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Intense Quote"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 1"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 2"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 3"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 4"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 5"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="60" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Shading Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="61" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light List Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="62" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Light Grid Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="63" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 1 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="64" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Shading 2 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="65" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 1 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="66" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium List 2 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="67" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 1 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="68" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 2 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="69" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Medium Grid 3 Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="70" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Dark List Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="71" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Shading Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="72" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful List Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="73" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" Name="Colorful Grid Accent 6"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="19" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Subtle Emphasis"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="21" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Intense Emphasis"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="31" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Subtle Reference"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="32" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Intense Reference"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="33" SemiHidden="false"
UnhideWhenUsed="false" QFormat="true" Name="Book Title"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="37" Name="Bibliography"/> <w:LsdException Locked="false" Priority="39" QFormat="true" Name="TOC Heading"/> </w:LatentStyles> </xml><![endif]--><style>
<!--
/* Font Definitions */
@font-face
{font-family:"Cambria Math";
panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4;
mso-font-charset:0;
mso-generic-font-family:roman;
mso-font-pitch:variable;
mso-font-signature:-1610611985 1107304683 0 0 159 0;}
/* Style Definitions */
p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal
{mso-style-unhide:no;
mso-style-qformat:yes;
mso-style-parent:"";
margin:0in;
margin-bottom:.0001pt;
mso-pagination:widow-orphan;
font-size:12.0pt;
font-family:"Times New Roman","serif";
mso-fareast-font-family:"Times New Roman";}
.MsoPapDefault
{mso-style-type:export-only;
margin-bottom:10.0pt;
line-height:115%;}
@page Section1
{size:8.5in 11.0in;
margin:1.0in 1.0in 1.0in 1.0in;
mso-header-margin:.5in;
mso-footer-margin:.5in;
mso-paper-source:0;}
div.Section1
{page:Section1;}
-->
</style><!--[if gte mso 10]> <style>
/* Style Definitions */
table.MsoNormalTable
{mso-style-name:"Table Normal";
mso-tstyle-rowband-size:0;
mso-tstyle-colband-size:0;
mso-style-noshow:yes;
mso-style-priority:99;
mso-style-qformat:yes;
mso-style-parent:"";
mso-padding-alt:0in 5.4pt 0in 5.4pt;
mso-para-margin-top:0in;
mso-para-margin-right:0in;
mso-para-margin-bottom:10.0pt;
mso-para-margin-left:0in;
line-height:115%;
mso-pagination:widow-orphan;
font-size:11.0pt;
font-family:"Times New Roman","serif";}
</style> <![endif]--> </m:defjc></m:rmargin></m:lmargin></m:dispdef></m:smallfrac><br />
<div class="MsoNormal" style="margin-left: 63pt; text-align: justify;"><br />
</div><b><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif"; font-size: 10pt;">Tabel A-1.1. Penemuan-penemuan penting dalam sejarah perkembangan kultur jaringan tanaman</span></b><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"> </span><br />
<div class="separator" style="clear: both; text-align: center;"><a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhHAp2_VYRQgL7_QsyRj1oB1qolOobJEQyUC0VOHkRN-mh4659N5vlMIhyLrkb2R1E81FdXdrCpqoVhMIbXdj6fNv4912fGZtbmUz3N49zIKcwsSPqe-Ljb1-d4Vhqmj0oPgMh4t9cvVLg/s1600-h/sejarah+kjt.jpg" imageanchor="1" style="clear: left; float: left; margin-bottom: 1em; margin-right: 1em;"><img border="0" height="640" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhHAp2_VYRQgL7_QsyRj1oB1qolOobJEQyUC0VOHkRN-mh4659N5vlMIhyLrkb2R1E81FdXdrCpqoVhMIbXdj6fNv4912fGZtbmUz3N49zIKcwsSPqe-Ljb1-d4Vhqmj0oPgMh4t9cvVLg/s640/sejarah+kjt.jpg" width="542" /></a></div><span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"><br />
</span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span><br />
<span lang="IN" style="font-family: "Arial","sans-serif";"></span></div>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com1tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-8844511252450971072010-02-24T19:24:00.000-08:002010-02-24T22:20:26.919-08:00In Vitro Cloning Of Chrysanthemum<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj7-78chZg4QfTfRs4LYkVXGCJ1d7hT02yDprK87vXYZhP3ogi6-b-turN0VWr8kp3taeJIgGQI0-TqoP9EyUgNHhqBGNNG-oDbS8STMYSFtK7hAMaFZYrkCldrLGGbTbr5OLP-JyGvH04/s1600-h/Copy+of+PA280196.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442019812094856994" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj7-78chZg4QfTfRs4LYkVXGCJ1d7hT02yDprK87vXYZhP3ogi6-b-turN0VWr8kp3taeJIgGQI0-TqoP9EyUgNHhqBGNNG-oDbS8STMYSFtK7hAMaFZYrkCldrLGGbTbr5OLP-JyGvH04/s320/Copy+of+PA280196.JPG" style="cursor: pointer; float: right; height: 240px; margin: 0pt 0pt 10px 10px; width: 320px;" /></a><br />
Chrysanthemum (Chrysanthemum morifolium R.) is one of the ornamental plants that are very popular in Indonesia. These flowers are cultivated by small farmers to big business on the land with an altitude of 600-1200 m above sea level. Small farmers cultivating chrysanthemums by applying simple technologies, while large businesses using modern technology-based agribusiness. Development of chrysanthemum is also a positive impact on the economy in rural areas, particularly the increased income of farmers and communities involved in its development.<br />
In Indonesia, the demand for chrysanthemum increased 25% per year, even by the year 2003 the market demand increased 31.62%. Chrysanthemum exports to other countries like the Netherlands, Brunei, Singapore, Japan, and the UAE reached 1.44 million stalks (Plant Quarantine Station at Soekarno-Hatta 2003). High market demand that makes the chrysanthemum has a bright prospect to be developed both at present and the future (Ornamental Plant Research Center 2000).<br />
According Rukmana and Mulyana (1997), chrysanthemum production business in Indonesia are faced with several obstacles, among others, dependence on seeds from other countries, like Netherlands, Germany, the United States, and Japan is expensive. In addition, if the plant will be copied to pay royalties of 10% of the selling price of each stem. The condition causes a high seed prices and lower profits farmers or entrepreneurs chrysanthemum plants.<br />
Another problem is the degeneration of seeds, seed quality is decreasing with age as the parent plant, and the low quality of seeds produced. This is because the chrysanthemum shoots propagated by cuttings or seedlings (Rukmana and Mulyana 1997). To avoid or reduce the degeneration of seeds, manufacturers are required to update the parent plant on a periodic basis when the symptoms of degeneration became visible. Therefore, the development of varieties that have been produced by breeders of plants and application of appropriate propagation techniques are expected to resolve the issue.<br />
<br />
<br />
<a name='more'></a><br />
<br />
Chrysanthemum is a flower plant ornamental shrubs form with another name or Flower Chrysanthemum Gold (Golden Flower) come from the plains of China. Yellow chrysanthemum comes from the plains of China, known as Chrysanthenum indicm (yellow), C. morifolium (purple and pink) and C. daisy (round, ponpon). In Japan the 4th century began to grow chrysanthemums, and 797 years djadikan chrysanthemum as a symbol of imperial Japan with the title Queen of the East. Chrysanthemum plants from China and Japan to spread to Europe and France in 1795. Year 1808 Mr. Chelsa develop Colvil from 8 chrysanthemum varieties in the UK. Types or varieties of modern chrysanthemum allegedly began in the 17th century. Chrysanthemum entered Indonesia in 1800. Since 1940, chrysanthemum developed commercially.<br />
Botanical classification chrysanthemum plants are as follows: Divisions: Spermathophyta<br />
Sub Division: Angiospermae Family: Asteraceae<br />
Genus: Chrysanthemum Species: C. morifolium Ramat, C. indicum, C. etc. daisy.<br />
Types and varieties of chrysanthemum plants in Indonesia are generally hybrids derived from the Netherlands, the United States and Japan. Chrysanthemums grown in Indonesia consists of: a) local Chrysanthemum (chrysanthemum ancient) Derived from abroad, but has a long and adapt in Indoenesia then considered local chrysanthemum. Its features include the nature of life in the neutral day life cycle and between 7-12 months in a single planting. Example C. maximum yellow flowers widely planted in Lembang and white flowers in Cipanas (Cianjur). b) introduction Chrysanthemum (chrysanthemum chrysanthemum modern or hybrid) for days her life is as short and annual plants. Examples of this chrysanthemum is C. indicum hybr. Dark Flamingo, C. i.hybr. Dolaroid, C. i. Hybr. Indianapolis (yellow flowers) Cossa, Clingo, Fleyer (white flowers), Alexandra Van Zaal (red flowers) and Pink Ping Pong (pink flowers). c) product Chrysanthemum Indonesia Ornamental Plants Research Center has released Cipanas varieties of chrysanthemum varieties of artificial Balithi Indonesia 27,108, 13.97, 27,177, 28.7 and 30.13A<br />
Uses major chrysanthemum is a flower decoration. Another benefit is a traditional medicinal plant and insect toxin producing. As an ornamental flower, chrysanthemum in Indonesia is used as: a) Interest Identified by the figure of the pot small plants, 20-40 cm tall, flowering and suitable dense planted in pots or other containers polibag. Examples of mini chrysanthemum (small flower diameter) are varieties of Lilac Cindy (flower color purplefish ping), Pearl Cindy (pinkish white), Cindy White (white with white middle-green), Applause (bright yellow), Yellow Mandalay (all from the Netherlands). Krisan introduction of widely planted flowering as flower pots, there are 12 varieties potted chrysanthemums in Indonesia, which is the most planted varieties Delano (purple), Rage (red) and Time (yellow). b) Interest Identified by the figure of cut flowers to high short-sized, has a long flower stalk, varied sizes (small, medium and large), are generally planted in the field and the results can be used as cut flowers. Examples of cut flowers is very much including Inga, Improved funshine, Brides, Green peas, Great verhagen, Puma, Reagents, Cheetah, etc. Klondike.<br />
Regional centers chrysanthemum producers include: Cipanas, Cisarua, Sukabumi, Lembang (West Java), Bandungan (Central Java), Brastagi (North Sumatra).<br />
Chrysanthemum plants need adequate water, but do not withstand exposure to rain water. Therefore, for local high rainfall, planting in a plastic house building. 2) For flowering requires a longer light that is with the help of TL lamps and incandescent lamps. Addition of radiation is best middle of the night between 22.30-01.00 hours with 150 watt lamps for area 9 m2 and high mounted lamp 1.5 m above the ground. Period lighting installation is done until vegetative phase (2-8 weeks) to encourage the formation of flowers. 3) The best temperature as untukdaerah tropical Indonesia is between 20-26 degrees C. Tolerant of air temperature to keep growing is 17-30 degrees C. 4) chrysanthemum plants require high humidity to the early formation of roots of seedlings, cuttings required 90-95%. Young plants to maturity between 70 - 80%, balanced with adequate air circulation. 5) CO2 levels in the wild around 3000 ppm. CO2 levels are ideal for spur fotosistesa between 600-900 ppm. In chrysanthemum cultivation in closed buildings, such as plastic house, greenhouse, CO2 can be added, to reach the recommended levels.<br />
<br />
<br />
<br />
<span style="font-weight: bold;">Expand With Tissue Culture</span><br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj0dZDvTCh1BJH6ETkd1cNvK3irXWT0pKN64nxFli4s9PXDM6tB-ecC_qq5cE6e52n62ao24BYpQkz9ipC6pECge3n_gXIeBdSHlTw6VTLuVd-_Pz54AmKqvfIg6Ryi6DCUs71gsgVQxZw/s1600-h/PA070070.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442020172991315250" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEj0dZDvTCh1BJH6ETkd1cNvK3irXWT0pKN64nxFli4s9PXDM6tB-ecC_qq5cE6e52n62ao24BYpQkz9ipC6pECge3n_gXIeBdSHlTw6VTLuVd-_Pz54AmKqvfIg6Ryi6DCUs71gsgVQxZw/s320/PA070070.JPG" style="cursor: pointer; float: left; height: 240px; margin: 0pt 10px 10px 0pt; width: 320px;" /></a><br />
Tissue culture is a method for isolating parts of plants such as protoplasm, cells, a group of cells, tissues and organs, and grow them in aseptic conditions, so that these parts can be propagated and regenerated into whole plants again.<br />
The purpose tissue culture activities are mass propagation of plants is usually very slow with conventional methods in large quantities in a short time, but it acquired a virus-free plants, helping plants pemulian to accelerate the achievement of research goals in the regular plant vegetatively propagated.<br />
<br />
<br />
<br />
The steps in Chrysanthemum Tissue Culture<br />
<br />
Decision eksplan or source of eksplan chrysanthemum buds and nodes derived from the parent plants in a greenhouse chrysanthemum Balithi Germination planlet mountain and tissue culture laboratory Balithi mountain. Making Media MS media used for the chrysanthemum is a media mountain Balithi bud induction and multiplication media. Composition of media used for shoot induction was ½ MS + 0.5 IAA composition of the medium used for propagation was ½ MS + 0.1 IAA Preparing Eksplan the multiplication of tissue culture plants eksplan is an important factor determining success. The things that should be considered in selecting the material culture of the plant species, plant parts used, the surface morphology, growth environment, crop conditions, and the season take time. Generally the plant is used as a network of young eksplan current having a high regeneration.<br />
Eksplan used in chrysanthemum plants is due to menginduks node aksilar buds. Aseptic culture of Chrysanthemum Sterilization Sterilization is an activity to remove contaminants attached organisms on the surface eksplan. The main purpose of this stage is to seek the aseptic culture and aksenik. Aksenik means free from undesirable microorganisms, whereas aseptic means free of microorganisms.<br />
<br />
Selection And Preparation Plant Master<br />
<br />
Before doing tissue culture plants for a first activity to be done is to choose parent plants to diperbanya. Plants. Selection to obtain clones, the desired clones. Clones that have different properties, unique, stable and uniform, then made the single stem plants and as a donor plant (eksplan materials) for propagation in vitro. Planlet (plants) results from the multiplication of in vitro and in greenhouse diaklimatisasi. After the plants to adapt to the greenhouse environment and then reproduced for the purposes of the parent plant that will produce the production plant.<br />
It is very important for the environment should be tanamn parent heginis to get eksplan quality and cleaner for breeding in-vintro.<br />
The work carried out in laminar space in order to avoid contaminants. Planting grouped by segment number. Each bottle filled 5 eksplan and repeated four times. Subsequent culture bottles incubated in growth room with 16-hour lighting fluorescent lamps under 40 watts, the temperature of 24-26 oC, and 60-80% humidity until eksplan grow planlet (plant tissue culture results had completed the plant parts including roots, stems, and leaves).<br />
<br />
<br />
How to Sterilization For Chrysanthemum Plant<br />
<br />
Taking eksplan already selected on the basis of durability Vigor, pest and disease, and the number of leaves from 4 to 5 pieces or<br />
3 to 4 nodes.<br />
• Cutting eksplan per node by reducing or cutting some leaves.<br />
• Eksplan immersed in a solution Benlatte and Bactomicyn (fungicide and bactericide), each of 1 g/300 ml-aquades while jocok beaten for 30 minutes.<br />
• eksplan rinse with water aquadest by 4 - 5 times.<br />
• Next eksplan brought to laminar.<br />
• Eksplan incorporated into a solution of 2 tetes/100 ml tween aquades with beaten-whipped for 5 minutes.<br />
• Eksplan incorporated into Chlorox 0.5% solution for 5 minutes, shake-shake.<br />
• Next eksplan inserted into Chlorox 1% solution for 3 minutes, shake-shake.<br />
• Eksplan rinsed with distilled water as much as 5 to 6 times.<br />
<br />
<br />
<br />
Eksplan Planting Planting Activities and Media<br />
<br />
Eksplan planting culture in a bottle called inoculation. This activity is performed after eksplan sterilized, beginning with the cut surface eksplan. Eksplan next node in the form of two fruit grown in ½ MS medium + IAA 0.5 mg / l, while a top eksplan not need to be planted, just put it on the same medium as much as 3 units. Before closing with plastic wrap, clear plastic, and rubber, bottles that have been planted media first heated above the Bunsen flame. Next bottle labeled plant species and planting date. Eksplan who has taken to the dikulturkan incubation and allowed to grow.<br />
<br />
<br />
Multiplication<br />
Cutting or Multipikasi aims to reproduce propagule whereas, sub-culture is an attempt to replace the tissue culture media with new media, so that the nutritional needs for growth of callus can be fulfilled. The following is a description of the implementa-tion sub-culture techniques on solid media. From the first media, culture media was transferred to regerasi for about three weeks. After that, if we aim to reproduce or propagule multifikasi, then we do the transfer of new media and trunked plants if we do cuttings / cutting of chrysanthemum example we multiply by cutting perbuku. Or a couple of books depending on the point of growing leaves, which will become a new branch.<br />
But usually done cuttig chrysanthemum growing stelah tanamn perfect and great. This is to memeudahkan multiplication, so it can memeprbanyak without limit.<br />
Shoots in the laboratory propagation of tissue culture shoots were selected to obtain a healthy growth, good Vigor, and no symptoms deviation. Tunas elected then removed from the bottle carefully with a scalpel knife, then cut each segment / segments of the book from 1 to 4. Cutting is carried out in petridis using a knife culture. Plant part used is the top or sides 1, 2, 3, and 4. and stelah was incorporated into the culture media with media sub ½ MS + 0.5 IAA.<br />
Root formation generally begins with the removal of indol acetic acid (IAA), produced shoots to the stems of plants that stimulate the formation of injuries to the root (Brenner et al. 1987).<br />
After pomotongan, cuttings generally not sensitive to hormones. In this phase occurs dediferensiasi, the cells become competent and responsive to hormones. After that the active cells divide (are meristematic) Primordia formation followed by roots, root formation until the roots grow and develop (De Klerk et al. 1999). Auksin generally play an important role in the initiation of root formation. The role will be optimal if auksin environmental factors are also optimal.<br />
<br />
<br />
Acclimatization<br />
<br />
Acclimatization is the final activity tissue culture techniques. Acclimatization is the process of moving from planlet a controlled environment to uncontrolled environmental conditions, both temperature, light, and humidity. Acclimatization is to adapt the results of tissue culture plants to the new environment before it is planted and used as parent plants for the production and to determine the ability of adaptation of plants growing in environments that are less aseptic.<br />
Environmental conditions change drastically, from the controlled environment is not controlled, the temperature is relatively stable to fluctuating temperature environments, from high to low humidity and fluctuating, and from low light to high light generally causes the plants susceptible to stress or stress, loss of water , wither, and die therefore, the process of acclimatization should be done in stages, as applied Winarto (2002) in carnations. Acclimatization will help crops adapt to changing environmental conditions such as temperature, humidity, and light intensity.<br />
<br />
Acclimatization method is divided into 2, namely the direct method (direct) and indirect method (indirect).<br />
<br />
Direct Method:<br />
1. Preparing planlet in bottles that will diaklimatisasi and out planlet carefully from the bottle.<br />
2. Cleaning the roots of plants from the agar-agar is still attached to the water.<br />
3. Soaking the roots in a fungicide and bactericide solution for 5 minutes.<br />
4. Planting crops in the media like charcoal that has been soaked husk.<br />
5. Cover the tub with a transparent plastic sub 1 - 2 weeks.<br />
6. 1 -2 weeks after the plastic is left open and the plants grow and thrive in the tub until the third week of acclimatization to fourth.<br />
7. Later transferred to the plant-polibag small polibag until ready for planting in the field.<br />
<br />
Indirect Method:<br />
1. Preparing planlet in bottles that will diaklimatisasi and out planlet carefully from the bottle<br />
2. Cut the plant right at the bottom of the third node and then immersion in a solution of fungicide and bactericide for 5 minutes.<br />
3. Planting crops in the media like charcoal that has been soaked husk.<br />
4. Cover the tub with a transparent plastic sub 1 - 2 weeks.<br />
<br />
<br />
Planlet acclimatization on Greenhouse<br />
Acclimatization is an important step in the process of tissue culture. This stage is often a critical point in the tissue culture technique applications. Acclimatization is required for plant tissue culture results generally have a thin wax coating and not yet well developed, the cells in the maximum-developed palisade, vascular tissue from roots to shoots are less developed, and stomata are often not functional, ie can not be closed at the time of evaporation high. <br />
<br />
<br />
<span style="font-weight: bold;">standar type</span><br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgAaUXfuRdAP0DtD9OD0Xp8vVMWQ0RDi9lIYXgvHjDnGmuvbXjc-kHVwLWrwNjLlbamHW5wLkZlQbrHo9KPsCm_9sdfImRHp5kWwcY1CnNQjNeZy8xr7tuv5d3cFQTzhPP0ndJXU2_ZqOc/s1600-h/PA280196.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442020811522307442" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEgAaUXfuRdAP0DtD9OD0Xp8vVMWQ0RDi9lIYXgvHjDnGmuvbXjc-kHVwLWrwNjLlbamHW5wLkZlQbrHo9KPsCm_9sdfImRHp5kWwcY1CnNQjNeZy8xr7tuv5d3cFQTzhPP0ndJXU2_ZqOc/s400/PA280196.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a><br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjqVyyZR0A8yn2zcmR99KPZ0EqthijSTzKnAkKCf8VW2R3cbNZ0CWbTJMtiLHD38kkgstiDROkZgXZxIdlhz9_G8FJe21YeFKML_Wv4g2clQ3omQmqo0e6TRU48q7jeZrrvcOtledB8pI4/s1600-h/PA280197.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442022072531976066" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjqVyyZR0A8yn2zcmR99KPZ0EqthijSTzKnAkKCf8VW2R3cbNZ0CWbTJMtiLHD38kkgstiDROkZgXZxIdlhz9_G8FJe21YeFKML_Wv4g2clQ3omQmqo0e6TRU48q7jeZrrvcOtledB8pI4/s400/PA280197.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a><br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjwPqXLk9sNv4qMPxNPyBgzRJ9iuZwnL9qm4xVF9xInPukZ9aZR5qAB6sOdFZiKrqPfrEng3SKOqHDnhKuD6U-raVjD5R2CJmpoA_YG3qcOWncAQ20vef1Lwmz25NxUz0jUfTWoJmz9LoQ/s1600-h/PA280251.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442022417771035970" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEjwPqXLk9sNv4qMPxNPyBgzRJ9iuZwnL9qm4xVF9xInPukZ9aZR5qAB6sOdFZiKrqPfrEng3SKOqHDnhKuD6U-raVjD5R2CJmpoA_YG3qcOWncAQ20vef1Lwmz25NxUz0jUfTWoJmz9LoQ/s400/PA280251.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a><br />
<br />
<br />
<br />
<span style="font-weight: bold;">spray type</span><br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhEqJKc53JxAXNbHL6V-XOO4Kvj3mTP_5PrQpoaL-Epdp0a0aodLQc52QICR3OLEiejlA8-YH55ICpCxdSNbYFm1d2dIR0oh5XT9Denric5tAljCP_bpFA9EDeRlSPZ3AiFh3fehAKV0EY/s1600-h/PA280217.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442022679288140386" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhEqJKc53JxAXNbHL6V-XOO4Kvj3mTP_5PrQpoaL-Epdp0a0aodLQc52QICR3OLEiejlA8-YH55ICpCxdSNbYFm1d2dIR0oh5XT9Denric5tAljCP_bpFA9EDeRlSPZ3AiFh3fehAKV0EY/s400/PA280217.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a><br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiJDILiwyLShV30INurm5S2A4hbIYZBVu8YgzIWWXFGLlrB3hVSoRP7RTu6VcCa9XXD2vgju7SqM3OtpB-jpOuo2mnP8zx254qg5ECdSq1Ip7ZNVAC_WMaEW0t4QFxGVzfhuw_9gzvQyS0/s1600-h/PA280222.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442022923566594370" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiJDILiwyLShV30INurm5S2A4hbIYZBVu8YgzIWWXFGLlrB3hVSoRP7RTu6VcCa9XXD2vgju7SqM3OtpB-jpOuo2mnP8zx254qg5ECdSq1Ip7ZNVAC_WMaEW0t4QFxGVzfhuw_9gzvQyS0/s400/PA280222.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a><br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhi4DHfUyrjIovZmnhT217Q5pgsjmZFT6EpwaT6WVV5lcKaZTS4WlVbVv5xqhTb2o_X_sYKPap0kAbDHSCHYO2q1oD6tgq4EcPlbC0QQK4OZ1czrKvFEVG7ag4o_lxvc11cDsYnn1O7e-E/s1600-h/PA280218.JPG" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5442023214956759842" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEhi4DHfUyrjIovZmnhT217Q5pgsjmZFT6EpwaT6WVV5lcKaZTS4WlVbVv5xqhTb2o_X_sYKPap0kAbDHSCHYO2q1oD6tgq4EcPlbC0QQK4OZ1czrKvFEVG7ag4o_lxvc11cDsYnn1O7e-E/s400/PA280218.JPG" style="cursor: pointer; display: block; height: 300px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 400px;" /></a>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com2tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-80786748110997885492010-02-16T23:27:00.000-08:002010-02-24T22:20:26.923-08:00PERBANYAKAN MIKRO (MIKROPROPAGASI)Propagasi klonal invitro dikenal dengan istilah mikropropagasi. Kata klon digunakan pertama kali oleh Webber untuk tanaman budidaya yang dihasilkan dari propagasi vegetatif. Jadi propagasi klonal adalah multiplikasi dari individu gen identik melalui reproduksi aseksual sedangkan klon itu sendiri adalah satu populasi tanaman derivat (turunan) dari satu individu tunggal yang dihasilkan melalui reproduksi aseksual.<br />
<br />
Seiring dengan perkembangan pemahaman dan kemajuan kultur jaringan maka dewasa ini teknik-teknik kultur jaringan telah digunakan untuk berbagai tujuan termasuk industri bibit tanaman. Teknik perbanyakan mikro (mikropropagasi) telah lama digunakan dan merupakan salah satu contoh menarik dan klasik dari penerapan teknik kultur jaringan. Teknik ini dilakukan dengan cara menanam eksplan berupa pucuk beserta jaringan meristemnya yang dikenal sebagai teknik kultur pucuk (shoot tip culture) atau menanam tunas lateral dengan satu atau lebih buku (single node and multiple node culture). Teknik terakhir juga dikenal dengan istilah invitro layering.<br />
<br />
Perbanyakan mikro secara umum dapat diartikan sebagai usaha menumbuhkan bagian tanaman dalam media aseptis kemudian memperbanyak bagian tanaman tersebut sehingga dihasilkan tanaman sempurna dalam jumlah banyak. Tujuan utamanya adalah memproduksi tanaman dalam jumlah besar dan waktu yang singkat. <br />
<br />
Teknik ini juga dikenal dengan upaya clonning untuk memproduksi klon tanaman dari jaringan vegetatif. Oleh karena itu tanaman yang dihasilkan melalui upaya clonning ini adalah identik atau serupa dengan induknya. Untuk mengenal lebih jauh tentang mikropropagasi akan dibahas tentang:<br />
a.Manfaat Teknik Mikropropagasi <br />
b.Metode Perbanyakan Secara Invitro <br />
c.Faktor-faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan Perbanyakan Tanaman secara Invitro<br />
d.Macam-macam Mikropropagasi.<br />
<br />
a. Manfaat Teknik Mikropropagasi<br />
Manfaat Mikropropagasi dalam Pemuliaan Tanaman<br />
Teknik mikropropagasi dalam pemuliaan tanaman pada umumnya digunakan antara lain, untuk:<br />
1)Menghasilkan tanaman bebas penyakit (nematoda, mycoplasma, viroid, virus,dan jamur) <br />
2)Menghasilkan kultivar baru atau tanaman superior, hybrid baru, seleksi dan klon lokal, dan genotip elit <br />
3)Menghasilkan galur tetua jantan steril <br />
4)Menghasilkan induksi mutan secara spontan <br />
5)Membuat variasi genetik. <br />
<br />
Selain manfaatnya tersebut, perbanyakan dengan teknik kultur jaringan ini juga memiliki kelemahan antara lain agar usaha ini berhasil diperlukan ketrampilan khusus, fasilitas pendukung produksi yang khusus, diperlukan metode-metode khusus untuk mengoptimalkan produksi masing-masing varietas tanaman dan spesies, dan karena metode yang dewasa ini tersedia membutuhkan banyak tenaga kerja maka biaya produksinya umumnya tinggi.<br />
<br />
Selain hal tersebut dapat terjadi variasi tanaman yang dihasilkan dari perbanyakan secara invitro sehingga tanaman yang dihasilkan berbeda dengan induknya. Variasi ini dikenal dengan istilah variasi somaklonal karena variasi muncul pada klon yang dihasilkan dari organ-organ somatik (vegetatif). Hal ini dapat terjadi karena tanaman terus menerus dan dalam waktu lama ditanam dan diperbanyak dalam media yang mengandung hormon pertumbuhan tertentu. <br />
<br />
Variasi ini juga timbul bilamana eksplan ditanam dalam media yang memungkinkan terbentuknya kalus. Pembelahan sel yang sangat cepat pada kalus dapat mengakibatkan perubahan genetis sel-sel kalus akibat penyimpangan informasi genetis yang diterima oleh masing-masing sel kalus tersebut. Variasi somaklonal ini dapat dikurangi dengan cara: <br />
1)Membatasi jumlah sub-kultur dan perbanyakannya, <br />
2)Menanam dalam medium tanpa hormon pertumbuhan untuk satu atau dua periode sub kultur dan <br />
3)Jika memungkinkan menghindari perbanyakan melalui kultur kalus. Namun pada beberapa jenis tanaman, terutama tanaman yang tidak bisa diperbanyak dengan stek dan sulit dirangsang pembentukan tunas-tunas adventifnya maka kultur kalus yang diregenerasikan melalui organogenesis dan embryogenesis merupakan alternatif perbanyakan yang memungkinkan. Apabila variasi somaklonal tidak dapat dihindari, perlu dilakukan pengujian sifat-sifat tanaman yang diregenerasikan sebelum klon dijual secara komersial.<br />
<br />
b. Metode Perbanyakan Mikro Secara Invitro<br />
Metode perbanyakan vegetatif tanaman secara invitro adalah merupakan pengembangan dari teknik-teknik perbanyakan vegetatif yang telah dilakukan secara konvensional seperti stek, layering dan cangkok. Tujuan perbanyakan konvensional, misalnya stek, adalah merangsang terbentuknya organ adventif (akar pada stek batang, akar dan tunas pada stek daun dan stek akar) pada bahan stek dan jumlah bibit yang diperoleh dari satu bahan stek umumnya hanya satu. Pada perbanyakan vegetatif secara invitro umumnya digunakan tidak hanya untuk merangsang terbentuknya organ tanaman (akar, batang dan daun) namun juga memperbanyaknya sebelum tanaman kecil (plantlet) ini dipindahkan dari tabung kultur ke lapangan. <br />
<br />
Metode yang dapat dilakukan dalam mikropropagasi tanaman dilakukan secara bertahap sejak tahap persiapan dan perlakukan stok tanaman (tahap 0) sampai tahap aklimatisasi (tahap IV). <br />
Di atas telah dijelaskan bahwa mikropropagasi dilakukan dalam beberapa tahapan. Tahapan-tahapan ini bukan hanya menjelaskan prosedur mikropropagasi, namun juga menjelaskan saat perubahan pada lingkungan kultur misalnya perubahan komposisi dan konsentrasi zat pengatur tumbuh yang digunakan dalam media. Ada lima tahapan dalam mikropropagasi, yaitu: <br />
Tahap 0: tahap persiapan (preparasi)<br />
Tahap 1: tahap induksi (pemacuan)<br />
Tahap 2: tahap multiplikasi (perbanyakan)<br />
Tahap 3: tahap pengakaran<br />
Tahap 4: tahap transplantasi (pemindahahan) ke media terrestrial.<br />
Tahap 0: persiapan (preparasi), seleksi dan persiapan pohon induk <br />
Tahapan ini dilakukan sebelum eksplan diambil untuk perbanyakan. Pohon induk yang akan digunakan sebagai sumber eksplan harus dipilih secara hati-hati. Pohon ini adalah pohon dari spesies atau verietas yang akan diperbanyak, mempunyai vigor yang sehat dan bebas dari gejala serangan hama atau penyakit. Pohon induk atau bagian tanaman yang akan diambil sebagai eksplan perlu diperlakukan khusus agar mikropropagasi berhasil. <br />
Perlakuan-perlakuan tersebut antara lain :<br />
1)Penanaman di green house atau pot untuk mengurangi sumber kontaminan <br />
2)Pemberian lingkungan yang sesuai atau perlakuan kimia untuk meningkatkan<br />
kecepatan multiplikasi dalam kondisi invitro <br />
3)Indexing atau prosedur lain untuk mengetahui adanya penyakit sistemik oleh virus atau bakteri <br />
4)Perangsangan pertumbuhan tunas-tunas dorman. <br />
<br />
Pada permulaan pengerjaan kultur jaringan problem terbesar yang dihadapi adalah mengatasi kontaminasi. Tempat pengambilan eksplan sangat berpengaruh terhadap besarnya resiko kontaminasi oleh infeksi jamur. Eksplan yang diambil dari rumah kaca yang terjamin kondisi kehegienisannya akan jauh dapat mengurangi resiko terkontaminasi oleh infeksi jamur dibanding bila eksplan diambil dari lapangan. Namun ada yang lebih sulit untuk menghindari kontaminasi terhadap bakteri, karena sering sulit untuk membedakan apakah kontaminasi tersebut berasal dari bakteri endogin atau eksogin.<br />
<br />
Idealnya tanaman induk yang akan dijadikan sebagai eksplan sebaiknya ditanam di dalam rumah kaca yang terjaga kehegienisannya. Ini tidak hanya dapat mereduksi populasi jumlah mikroorganisme yang hidup di permukaan tanaman, tetapi juga membantu untuk memproduksi tanaman berkualitas.<br />
<br />
Pada tahap 0 termasuk juga beberapa intervensi yang dapat membuat eksplan lebih sesuai atau lebih siap sebagai material awal. Faktor-faktor yang berpengaruh dalam tanaman induk yang dimikropropagasi adalah cahaya, temperatur dan zat pengatur tumbuh.<br />
<br />
Tahap 1 : tahap awal atau induksi (inisiasi)<br />
Tahap awal ini sangat penting dan menentukan bagi keberhasilan mikropropagasi. Keberhasilan tahap ini pertama kali terlihat dari keberhasilan penanaman eksplan pada kondisi aseptis (bebas dari segala kontaminan) dan harus diikuti dengan pertumbuhan awal eksplan sesuai tujuan penanamannya (misalnya: perpanjangan pucuk, pertumbuhan awal tunas, atau pertumbuhan kalus pada eksplan). Setelah 1–2 minggu inkubasi, kultur yang terkontaminasi oleh bakteri atau jamur (baik pada media maupun eksplannya) dibuang. Tahap ini selesai dan kultur bisa dipindahkan ke tahap berikutnya bila eksplan yang tidak terkontaminasi telah tumbuh sesuai dengan harapan (misalnya tunas lateral atau tunas adventif tumbuh). Untuk eksplan yang mengalami kontaminasi berat atau yang sulit untuk disterilisasi maka eksplan terlebih dahulu dapat ditanam pada media inkubasi atau establishment yaitu media yang hanya mengandung gula dan agar saja dengan tujuan untuk isolasi eskplan yang tidak terkontaminasi sebelum diinisiasi pada tahap 1 mikropropagasi.<br />
<br />
Tujuan dari tahap ini adalah memproduksi kultur axenic. Untuk kebanyakan pekerjaan mikropropagasi, eksplan yang dipilih adalah tunas aksilar atau terminal. Faktor-faktor yang berpengaruh pada keberhasilan pada tahap ini adalah:<br />
1)Umur tanaman induk <br />
2)Umur fisiologis dari eksplan <br />
3)Tahap perkembangan dari eksplan <br />
4)Ukuran dari eksplan. <br />
<br />
Reaksi hipersensitif<br />
Ketika jaringan tanaman diekspos pada situasi stress seperti luka mekanikal, metabolisme fenolik komplek terstimulasi. Intervensi ini menyebabkan reaksi hipersensitif, seperti:<br />
<br />
<br />
1)Melepaskan isi sel-sel yang rusak <br />
2)Reaksi-reaksi di dalam sel-sel tetangganya tetapi tanpa menunjukkan gejala adanya luka itu sendiri <br />
3)Dan/atau mati prematur dari sel-sel yang spesifik dalam lingkungan luka atau tempat infeksi.<br />
<br />
Pada umumnya metabolisme fenolik komplek mempunyai 3 tipe reaksi dalam merespon stress atau luka, yaitu:<br />
1)Oksidasi dari terbentuknya fenolik komplek (munculnya senyawa quinon dan material polymerisasi) <br />
2)Pembentukan turunan monomerik <br />
3)Pembentukan turunan polimer fenolik. <br />
<br />
Pembentukan monomer fenolik di dalam jaringan dapat memacu untuk mengakumulasi sejumlah besar produk, atau munculnya produk baru yang berperan dalam mekanisme proteksi dari jaringan yang luka. Peranan dari pruduk ini dapat membentuk pembatas fisik melawan invasi (seperti lignin), atau senyawa inhibitor dari pertumbuhan mikrobia (seperti quinon atau fitoalexin).<br />
<br />
Umumnya, jaringan mengandung senyawa fenolik komplek berkonsentrasi tinggi, maka jaringan tersebut sulit untuk dikulturkan. Senyawa fenol adalah produk yang labil dan sangat mudah teroksidasi dan fenol teroksidasi dapat menjadi fitotoksit. <br />
<br />
Strategi untuk mereduksi atau menghilangkan senyawa fenolik komplek tersebut adalah: <br />
1)Mencuci atau membersihkan produk senyawa fenolik komplek dengan membersihkannya dengan merendam kedalam air pada jangka yang panjang atau mengabsorbsinya dengan arang aktif atau senyawa polyvinylpyrrolidone) <br />
2)Menghambat kerja enzim fenolase menggunakan agen khelat <br />
3)Mereduksi aktifitas fenolase dan kemampuan substrat dengan menggunakan pH rendah, dengan penambahan senyawa antioksidan seperti: asam askorbat, asam sitrat atau menginkubasikan kultur di dalam ruang gelap <br />
4)Mereduksi terjadinya stress pada eksplan, terutama pada waktu sterilisasi atau penanaman, induk tanaman yang higienis dapat mengurangi stress <br />
5)Penggunaan mikroelemen tertentu dapat menstimulasi terbentuknya senyawa fenol, seperti Mn2+ (berperan sebagai cofactor peroksidasi) dan Cu2+ (merupakan bagian dari enzim fenolase komplek). Oleh karena itu untuk jaringan yang menghasilkan fenolik komplek berlebihan disarankan untuk mengurangi konsentrasi atau tidak menggunakan unsur tersebut dalam media. <br />
6)Menginkubasikan kultur dalam ruangan yang bersuhu rendah <br />
7)Sebaiknya sebelum eksplan ditanam pada media perlakuan ditempatkan pada media tanpa zat pengatur tumbuh untuk mengurangi terjadinya pencoklatan atau penghitaman pada eksplan. <br />
<br />
Tahap 2: tahap perbanyakan (multiplikasi)<br />
Tujuan dari tahapan ini adalah untuk memperoleh dan memperbanyak tunas. Kultur axenik yang telah dihasilkan pada tahap 1 dan pada tahap 2 dipindahkan pada media yang kaya akan sitokinin agar eksplan dapat menghasilkan tunas yang banyak yang selanjutnya pada tahap 3 nanti tunas-tunas tersebut dipindahkan pada media pengakaran untuk memacu pertumbuhan akar. <br />
Pada tahap ini, eksplan dapat juga membentuk kalus (callogenesis) atau membentuk tunas (caulogenesis). Pada pertumbuhan kalus sering dihasilkan embrioid dan setiap embrioid nantinya akan membentuk individu tanaman baru (somatic embriogenesis), atau kadang memproduksi meristemoid yang akan tumbuh menjadi tunas (organogenesis). Callogenesis sering menimbulkan terjadinya aberasi genetik yang dikenal dengan istilah variasi somaklonal, sehingga tanaman yang dihasilkan tidak identik dengan tanaman induknya.<br />
Tunas yang diperoleh pada tahapan ini digunakan sebagai bahan perbanyakan berikutnya, oleh karena itu pada tahapan ini dilakukan banyak sub kultur untuk melipatgandakan jumlah plantlet yang dihasilkan. Pada tahapan ini, tunas yang dihasilkan dipotong-potong dengan teknik single-node/multiple node culture maupun dengan mengambil pucuknya sebagai eksplan untuk perbanyakan. Bahan tersebut kemudian ditanam pada media baru yang umumnya mengandung sitokinin pada konsentrasi yang lebih tinggi dari auksin. Pada tahap ini dapat digunakan media cair (media tanpa agar), semi padat maupun media padat. <br />
Dengan modifikasi media yang sesuai, tunas-tunas baru akan tumbuh dari potongan eksplan. Tahapan ini umumnya dilakukan sebanyak 8–10 kali sehingga akan dapat dihasilkan sejumlah besar tunas (ribuan tunas) dari satu eksplan pada tahapan inisiasi. Tunas tersebut selanjutnya dibesarkan atau diakarkan pada tahap mikropropagasi berikutnya.<br />
<br />
Tahap 3: persiapan plantlet sebelum aklimatisasi (tahapan penangkaran)<br />
Tunas atau plantlet yang dihasilkan dari tahapan ke 2 tersebut umumnya masih sangat kecil atau tunas yang belum dilengkapi dengan akar sehingga belum mampu untuk mendukung pertumbuhannya dalam kondisi invivo. Oleh karena itu, dalam tahap ini masing-masing plantlet yang dihasilkan ditumbuhkan untuk pembesaran, pengakaran dan perangsangan aktifitas fotosintesisnya. Teknik untuk mendapatkan plantula yang siap untuk di pindahkan ke media terrestrial pada tahap 4 antara lain, adalah:<br />
1) Media untuk pengakaran dan perpanjangan tunas. Media perakaran yang digunakan tanpa penambahan zat pengatur tumbuh. Kluster tunas yang dihasilkan pada tahap 2 disimpan pada media tanpa ZPT dengan kelembaban yang sangat tinggi <br />
2) Individu tunas (propagul) disubkultur ke media dengan mengurangi konsentrasi atau tanpa penambahan sitokinin dan menambah konsentrasi auksin serta kadang dengan mengurangi konsentrasi senyawa anorganik. Pada beberapa jenis tanaman pengakaran dapat dilakukan dengan cara menempakan tunas hasil tahap 2 (propagul) diletakkan pada aerasi media cair lebih baik dari pada pada media padat. Atau dengan cara memindahkan propagul ke media yang berisi auksin selama 1-2 hari, kemudian disubkultur lagi ke media tanpa auksin (induksi akar dipacu oleh adanya auksin, tetapi pertumbuhan akar dapat dihambat oleh keberadaan auksin dalam media). Atau propagul dicelupkan dalam larutan pangakaran (auksin) sebentar dan selanjutnya ditanam dalam medium tanpa auksin<br />
3) Tahapan pemanjangan ini dapat ditempuh dengan cara meletakkan propagul pada medium agar tanpa sitokinin atau dengan konsentrasi yang sangat rendah selamas 2-4 minggu. Pada beberapa tanaman menggunakan penambahan GA3 dalam medium. Selanjutnya propagul dipindahkan ke media lainnya seperti teknik sebelumnya <br />
4) Penggunaan media praaklimatisasi dan lingkungan kultur dengan penyinaran yang lebih intensitas cahayanya untuk perangsangan aktifitas fotosintesis misalnya penggunaan media dengan konsentrasi gula rendah/tanpa gula, penambahan intensitas cahaya, dan perlakuan dengan carbon dioksida.<br />
<br />
Tahap 4 : aklimatisasi <br />
Tahapan aklimatisasi ini adalah tahap pemindahan plantet dari kondisi invitro ke kondisi invivo. Tahap ini sangat penting dan harus dilakukan secara hati-hati, karena jika tidak dilakukan dengan baik maka sebagian besar plantet yang dihasilkan dapat mati/musnah. Plantlet dikeluarkan dari botol dan agar yang melekat pada akarnya dibersihkan, direndam dalam larutan fungisida, lalu ditanam dalam kompos atau medium porous yang bersih untuk merangsang pembentukan akar-akar serabutnya. Untuk mencegah kematian plantlet akibat transpirasi, plantlet disungkup dengan plastik atau ditempatkan pada ruangan dengan kelembaban tinggi, dengan suhu ruangan dan diletakkan ditempat yang ternaungi dengan intensitas cahaya 30%. Pada kasus tertentu, daun tanaman disemprot dengan anti transpirant (misalnya Abscicic acid) untuk mencegah penguapan yang terlalu besar dari daun. Secara perlahan, kelembaban dikurangi dan intensitas cahaya ditambah untuk merangsang fotosintesis.<br />
<br />
<br />
<br />
<a href="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiSnV-2pHS4h8bU6HcWhipByw9TICcBp2QskiOYOkQU51fvo1naYEjEC_oW7wk_pcN4SxtMiecJP3xCKxQpXjyCPo9NDF4PwTenRZSTJXR-KBmxkYLCaVbDcaiXoAQZTMnYE9k32eYOwd0/s1600-h/Picture1.jpg" onblur="try {parent.deselectBloggerImageGracefully();} catch(e) {}"><img alt="" border="0" id="BLOGGER_PHOTO_ID_5439113513818508082" src="https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiSnV-2pHS4h8bU6HcWhipByw9TICcBp2QskiOYOkQU51fvo1naYEjEC_oW7wk_pcN4SxtMiecJP3xCKxQpXjyCPo9NDF4PwTenRZSTJXR-KBmxkYLCaVbDcaiXoAQZTMnYE9k32eYOwd0/s320/Picture1.jpg" style="cursor: pointer; display: block; height: 320px; margin: 0px auto 10px; text-align: center; width: 273px;" /></a><br />
<br />
Gambar. Teknik Mikropropagasi: dari eksplan diinisiasi langsung untuk membentuk multiplikasi tunas; eksplan dapat berasal dari jaringan meristem, pucuk atau tunas samping (sumber: Taji, Kumar & Lakshmanan, 2002).<br />
<br />
<a name='more'></a><br />
<br />
<br />
<br />
<br />
<br />
c. Faktor-faktor yang Berpengaruh pada Keberhasilan Mikropropagasi<br />
1)Genotip tanaman<br />
Salah satu faktor yang sangat mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis eksplan dalam kultur invitro adalah genotip tanaman asal eksplan diisolasi. Hasil-hasil penelitian menunjukkan bahwa respon masing-masing eksplan tanaman sangat bervariasi tergantung dari spesies, bahkan varietas, atau tanaman asal eksplan tersebut. Pengaruh genotip ini umumnya berhubungan erat dengan faktor-faktor lain yang mempengaruhi pertumbuhan eksplan, seperti kebutuhan nutrisi, zat pengatur tumbuh, dan lingkungan kultur. Oleh karena itu, komposisi media, zat pengatur tumbuh dan lingkungan pertumbuhan yang dibutuhkan oleh masing-masing varietas tanaman bervariasi meskipun teknik kultur jaringan yang digunakan sama. <br />
Perbedaan respon genotip tanaman tersebut dapat diamati pada perbedaan eksplan masing-masing varietas untuk tumbuh dan beregenerasi. Masing-masing varietas tanaman berbeda kemampuannya dalam merangsang pertumbuhan tunas aksilar, baik jumlah tunas maupun kecepatan pertumbuhan tunas aksilarnya. Hal serupa juga terjadi pada pembentukan kalus, laju pertumbuhan kalus serta regenerasi kalus menjadi tanaman lengkap baik melalui pembentukan organ-organ adventif maupun embrio somatik. Regenerasi dan perkembangan organ adventif dan embrio somatik juga sangat ditentukan oleh varietas tanaman induk. Perbedaan pengaruh genetik ini disebabkan karena perbedaan kontrol genetik dari masing-masing varietas serta jenis kelamin tanaman induk.<br />
<br />
2)Media kultur<br />
Perbedaan komposisi media, komposisi zat pengatur tumbuh dan jenis media yang digunakan akan sangat mempengaruhi pertumbuhan dan regenerasi eksplan yang dikulturkan.<br />
a)Komposisi media. Perbedaan komposisi media, seperti jenis dan komposisi garam-garam anorganik, senyawa organik, zat pengatur tumbuh sangat mempengaruhi respon eksplan saat dikulturkan. Perbedaan komposisi media biasanya sangat mempengaruhi arah pertumbuhan dan regenerasi eksplan. Meskipun demikian, media yang telah diformulasikan tidak hanya berlaku untuk satu jenis eksplan dan tanaman saja. Beberapa jenis formulasi media bahkan digunakan secara umum untuk berbagai jenis eksplan dan varietas tanaman, seperti media MS. Namun ada juga beberapa jenis media yang diformulasikan untuk tanaman-tanaman tertentu misalnya WPM, VW dll. Media-media tersebut dapat digunakan untuk berbagai tujuan seperti perkecambahan biji, kultur pucuk, kultur kalus, regenerasi kalus melalui organogenesis dan embriogenesis. Media yang dibutuhkan untuk perkecambahan biji, perangsangan tunas-tunas aksilar umumnya lebih sederhana dibandingkan dengan media untuk regenerasi kalus baik melalui organogenesis maupun embryogenesis.<br />
b)Komposisi hormon pertumbuhan. Komposisi dan konsentrasi hormon pertumbuhan yang ditambahkan dalam media sangat mempengaruhi arah pertumbuhan dan regenerasi eksplan yang dikulturkan. Komposisi dan konsentrasi hormon pertumbuhan yang ditambahkan ke dalam media kultur sangat tergantung dari jenis eksplan yang dikulturkan dan tujuan pengkulturannya. Konsentrasi hormon pertumbuhan optimal yang ditambahkan ke dalam media tergantung pula dari eksplan yang dikulturkan serta kandungan hormon pertumbuhan endogen yang terdapat pada eksplan tersebut. Komposisi yang sesuai ini dapat diperkirakan melalui percobaan-percobaan yang telah dilakukan sebelumnya disertai percobaan untuk mengetahui komposisi hormon pertumbuhan yang sesuai dengan kebutuhan dan arah pertumbuhan eksplan yang diinginkan.<br />
<br />
Hormon pertumbuhan yang digunakan untuk perbanyakan secara invitro adalah golongan auksin, sitokinin, giberelin, dan growth retardant. Auksin yang umum dipakai adalah IAA (Indole Acetic Acid), IBA (Indole Butyric Acid), NAA (Naphtalena Acetic Acid), dan 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy Acetic Acid). Selain itu beberapa peneliti pada beberapa tanaman menggunakan juga CPA (Chlorophenoxy Acetic Acid). Sitokinin yang banyak dipakai adalah Kinetin (Furfuryl Amino Purine), BAP/BA (Benzyl Amino Purine/Benzyl Adenine), 2 i-P (2-isopentenyl Adenin). Beberapa sitokinin lainnya yang juga digunakan adalah zeatin, thidiazuron dan PBA (6(benzylamino)-9-(2-tetrahydropyranyl)-9H-purine). Hormon pertumbuhan golongan giberellin yang paling umum digunakan adalah GA3, selain itu ada beberapa peneliti yang menggunakan GA4 dan GA7, sedangkan growth retardant yang sering digunakan adalah Ancymidol, Paraclobutrazol dan TIBA, AbA dan CCC.<br />
c)Keadaan fisik media. Media yang umum digunakan dalam kultur jaringan adalah medium padat, medium semi padat dan medium cair. Keadaan fisik media akan mempengaruhi pertumbuhan kultur, kecepatan pertumbuhan dan diferensiasinya. Keadaan fisik media ini mempengaruhi pertumbuhan antara lain karena efeknya terhadap osmolaritas larutan dalam media serta ketersediaan oksigen bagi pertumbuhan eksplan yang dikulturkan. <br />
<br />
Media yang umum digunakan dalam mikropropagasi adalah media semi-solid (semi padat) dengan cara menambahkan agar. Media semi padat ini digunakan karena beberapa alasan antara lain: eksplan yang kecil mudah terlihat dalam media padat; selama kultur eksplan tetap berada pada orientasi yang sama; eksplan berada di atas permukaan media sehingga tidak diperlukan teknik aerasi tambahan pada kultur; orientasi pertumbuhan tunas dan akar tetap; dan kalus tidak pecah seperti jika ditempatkan pada media cair. Namun penambahan agar dalam beberapa kasus dapat menghambat pertumbuhan karena: agar mungkin mengandung senyawa penghambat yang dapat menghambat morfogenesis beberapa kultur atau memperlambat pertumbuhan kultur; eksudasi fenolik dari eksplan terserap oleh media yang menempel dengan eksplan sehingga dapat mempengaruhi pertumbuhan eksplan; agar harus dicuci bersih dari akar sebelum diaklimatisasi; dan perlu waktu yang lebih banyak untuk mencuci gelas kultur misalnya botol-botol harus diautoclave untuk melarutkan agar sebelum dicuci. <br />
<br />
3)Lingkungan Tumbuh<br />
a)Suhu. Tanaman umumnya tumbuh pada lingkungan dengan suhu yang tidak sama setiap saat, misalnya pada siang dan malam hari tanaman mengalami kondisi dengan perbedaan suhu yang cukup besar. Keadaan demikian bisa dilakukan dalam kultur invitro dengan mengatur suhu siang dan malam di ruang kultur, namun laboratorium kultur jaringan selama ini mengatur suhu ruang kultur yang konstan baik pada siang maupun malam hari. Umumnya temperatur yang digunakan dalam kultur invitro lebih tinggi dari kondisi suhu invivo. Tujuannya adalah untuk mempercepat pertumbuhan dan morfogenesis eksplan. <br />
<br />
Pada sebagian besar laboratorium, suhu yang digunakan adalah konstan, yaitu 25°C (kisaran suhu 17-32°C). Tanaman tropis umumnya dikulturkan pada suhu yang sedikit lebih tinggi dari tanaman empat musim, yaitu 27°C (kisaran suhu 24-32°C). Bila suhu siang dan malam diatur berbeda, maka perbedaan umumnya adalah 4-8°C, variasi yang biasa dilakukan adalah 25°C siang dan 20°C malam, atau 28°C siang dan 24°C malam. Meskipun hampir semua tanaman dapat tumbuh pada kisaran suhu tersebut, namun kebutuhan suhu untuk masing-masing jenis tanaman umumnya berbeda-beda. Tanaman dapat tumbuh dengan baik pada suhu optimumnya. Pada suhu ruang kultur dibawah optimum, pertumbuhan eksplan lebih lambat, namun pada suhu diatas optimum pertumbuhan tanaman juga terhambat akibat tingginya laju respirasi eksplan.<br />
<br />
b) Kelembaban relatif. Kelembaban relatif dalam botol kultur dengan mulut botol yang ditutup umumnya cukup tinggi, yaitu berkisar antara 80-99%. Jika mulut botol ditutup agak longgar maka kelembaban relatif dalam botol kultur dapat lebih rendah dari 80%. Sedangkan kelembaban relatif di ruang kultur umumnya adalah sekitar 70%. Jika kelembaban relatif ruang kultur berada dibawah 70% maka akan mengakibatkan media dalam botol kultur (yang tidak tertutup rapat) akan cepat menguap dan kering sehingga eksplan dan plantlet yang dikulturkan akan cepat kehabisan media. Namun kelembaban udara dalam botol kultur yang terlalu tinggi menyebabkan tanaman tumbuh abnormal yaitu daun lemah, mudah patah, tanaman kecil-kecil namun terlampau sukulen. Kondisi tanaman demikian disebut vitrifikasi atau hiperhidrocity. Sub-kultur ke media lain atau menempatkan planlet kecil ini dalam botol dengan tutup yang agak longgar, tutup dengan filter, atau menempatkan silica gel dalam botol kultur dapat membantu mengatasi masalah ini. <br />
c) Cahaya. Seperti halnya pertumbuhan tanaman dalam kondisi invivo, kuantitas dan kualitas cahaya, yaitu intensitas, lama penyinaran dan panjang gelombang cahaya mempengaruhi pertumbuhan eksplan dalam kultur invitro. Pertumbuhan organ atau jaringan tanaman dalam kultur invitro umumnya tidak dihambat oleh cahaya, namun pertumbuhan kalus umumnya dihambat oleh cahaya. <br />
<br />
Pada perbanyakan tanaman secara invitro, kultur umumnya diinkubasikan pada ruang penyimpanan dengan penyinaran. Tunas-tunas umumnya dirangsang pertumbuhannya dengan penyinaran, kecuali pada teknik perbanyakan yang diawali dengan pertumbuhan kalus. Sumber cahaya pada ruang kultur ini umumnya adalah lampu flourescent (TL). Hal ini disebabkan karena lampu TL menghasilkan cahaya warna putih, selain itu sinar lampu TL tidak meningkatkan suhu ruang kultur secara drastis (hanya meningkat sedikit). Intensitas cahaya yang digunakan pada ruang kultur umumnya jauh lebih rendah (1/10) dari intensitas cahaya yang dibutuhkan tanaman dalam keadaan normal. Intensitas cahaya dalam ruang kultur untuk pertumbuhan tunas umumnya berkisar antara 600-1000 lux. Perkecambahan dan inisiasi akar umumnya dilakukan pada intensitas cahaya lebih rendah. <br />
<br />
Selain intensitas cahaya, lama penyinaran atau photoperiodisitas juga mempengaruhi pertumbuhan eksplan yang dikulturkan. Lama penyinaran umumnya diatur sesuai dengan kebutuhan tanaman sesuai dengan kondisi alamiahnya. Periode terang dan gelap umumnya diatur pada kisaran 8-16 jam terang dan 16-8 jam gelap tergantung varietas tanaman dan eksplan yang dikulturkan. Periode siang/malam (terang/gelap) ini diatur secara otomatis menggunakan timer yang ditempatkan pada saklar lampu pada ruang kultur. Dengan teknik ini penyinaran dapat diatur konstan sesuai kebutuhan tanaman.<br />
<br />
4) Kondisi Eksplan<br />
Pertumbuhan dan morfogenesis dalam mikropropagasi sangat dipengaruhi oleh keadaan jaringan tanaman yang digunakan sebagai eksplan. Selain faktor genetis eksplan yang telah disebutkan di atas, kondisi eksplan yang mempengaruhi keberhasilan teknik mikropropagasi adalah jenis eksplan, ukuran, umur dan fase fisiologis jaringan yang digunakan sebagai eksplan.<br />
<br />
Meskipun masing-masing sel tanaman memiliki kemampuan totipotensi, namun masing-masing jaringan memiliki kemampuan yang berbeda-beda untuk tumbuh dan beregenerasi dalam kultur jaringan. Oleh karena itu, jenis eksplan yang digunakan untuk masing-masing kultur berbeda-beda tergantung tujuan pengkulturannya. <br />
<br />
Umur eksplan sangat berpengaruh terhadap kemampuan eksplan tersebut untuk tumbuh dan beregenerasi. Umumnya eksplan yang berasal dari jaringan tanaman yang masih muda (juvenil) lebih mudah tumbuh dan beregenerasi dibandingkan dengan jaringan yang telah terdiferensiasi lanjut. Jaringan muda umumnya memiliki sel-sel yang aktif membelah dengan dinding sel yang belum kompleks sehingga lebih mudah dimodifikasi dalam kultur dibandingkan jaringan tua. Oleh karena itu, inisiasi kultur biasanya dilakukan dengan menggunakan pucuk-pucuk muda, kuncup-kuncup muda, hipokotil, inflorescence yang belum dewasa, dll. Jika eksplan diambil dari tanaman dewasa, rejuvenilisasi tanaman induk melalui pemangkasan atau pemupukan dapat membantu untuk memperoleh eksplan muda agar kultur lebih berhasil.<br />
<br />
Ukuran eksplan juga mempengaruhi keberhasilan kultur. Eksplan dengan ukuran kecil lebih mudah disterilisasi dan tidak membutuhkan ruang serta media yang banyak, namun kemampuannya untuk beregenerasi juga lebih kecil sehingga dibutuhkan media yang lebih kompleks untuk pertumbuhan dan regenerasinya. Sebaliknya semakin besar eksplan, maka semakin besar kemungkinannya untuk membawa penyakit dan makin sulit untuk disterilkan, membutuhkan ruang dan media kultur yang lebih banyak. Ukuran eskplan yang sesuai sangat tergantung dari jenis tanaman yang dikulturkan, teknik dan tujuan pengkulturannya. <br />
<br />
d. Macam-macam Mikropropagasi<br />
1) Produksi tanaman dari tunas-tunas aksilar<br />
Produksi tanaman dengan merangsang terbentuknya tunas-tunas aksilar merupakan teknik mikropropagasi yang paling umum dilakukan. Ada 2 (dua) metode produksi tunas aksilar yang dilakukan yaitu kultur pucuk (shoot culture atau shoot-tip culture) dan kultur mata tunas (satu mata tunas: single-node culture; lebih dari satu mata tunas: multiple-node culture). Kedua teknik kultur ini berdasarkan pada prinsip perangsangan terbentuknya atau munculnya tunas-tunas samping dengan cara mematahkan dominasi apikal dari meristem apikal.<br />
<br />
2) Kultur pucuk (shoot culture atau shoot-tip culture)<br />
Kultur pucuk (shoot culture) adalah teknik mikropropagasi yang dilakukan dengan cara mengkulturkan eksplan yang mengandung meristem pucuk (apikal dan lateral) dengan tujuan perangsangan dan perbanyakan tunas-tunas/cabang-cabang aksilar. Tunas-tunas aksilar tersebut selanjutnya diperbanyak melalui prosedur yang sama seperti eksplan awalnya dan selanjutnya diakarkan dan ditumbuhkan dalam kondisi invivo.<br />
<br />
Istilah yang digunakan untuk teknik kultur pucuk ini tergantung dari eksplan yang digunakan. Jika eksplan yang digunakan adalah ujung pucuk-pucuk apikal (panjang ±20 mm) saja maka tekniknya disebut sebagai shoot-tip culture, namun bila eksplan yang digunakan adalah ujung pucuk apikal beserta bagian tunas lain dibawahnya disebut sebagai shoot culture. Besar kecilnya eksplan yang digunakan mempengaruhi keberhasilan kultur pucuk. <br />
<br />
Semakin kecil eksplan, semakin kecil kemungkinannya untuk terkontaminasi oleh mikroorganisme namun semakin kecil juga kemampuannya untuk beregenerasi dan memperbanyak diri. Sebaliknya, semakin besar eksplan yang digunakan maka semakin besar kemampuannya untuk beradaptasi dalam kondisi invitro, namun makin besar juga kemungkinannya untuk terkontaminasi, makin banyak kebutuhannya akan media dan makin besar wadah/botol kultur yang diperlukan. Oleh karena itu perlu diketahui ukuran eksplan yang sesuai untuk masing-masing varietas dan spesies tanaman.<br />
<br />
Pertumbuhan pucuk, inisiasi dan perbanyakan tunas aksilar yang dihasilkan umumnya dirangsang dengan cara menambahkan hormon pertumbuhan (umumnya sitokinin) ke dalam media pertumbuhannya. Perlakuan ini dapat merangsang pertumbuhan tunas samping dan mematahkan dominasi apikal dari pucuk yang dikulturkan. Selain itu, dominasi apikal juga dapat dihilangkan dengan perlakuan-perlakuan lain misalnya pemangkasan daun-daun yang terdapat pada buku-buku tunas atau meletakkan eskpan dalam posisi horisontal. Tunas-tunas aksilar yang dihasilkan selanjutnya digunakan sebagai stek miniatur bagi proses perbanyakan berikutnya. Dengan teknik ini dan disertai dengan sub kultur dapat diperoleh banyak sekali plantet dari satu eksplan. Dengan membatasi jumlah sub kultur sampai maksimal 8–10 kali dapat diperoleh klon tanaman yang true-to-type. <br />
<br />
3) Kultur mata tunas/Single-node atau multiple-node culture (Invitro Layering)<br />
Kultur mata tunas ini merupakan salah satu teknik invitro yang digunakan untuk perbanyakan tanaman dengan merangsang munculnya tunas-tunas aksilar dari mata tunas yang dikulturkan. Seperti halnya kultur pucuk, eksplan yang digunakan dalam kultur mata tunas dapat berasal dari tunas lateral, tunas samping atau bagian dari batang yang mengandung satu atau lebih mata tunas (mengandung satu atau lebih buku). Dikenal dua teknik kultur mata tunas yaitu eksplan yang mengandung mata tunas lebih dari satu ditanam secara horisontal di atas medium padat (teknik invitro layering) atau tiap buku yang mengandung satu mata tunas dipotong-potong dan ditanam secara terpisah dalam tiap-tiap botol kultur.<br />
<br />
Seperti halnya teknik kultur pucuk, pertumbuhan tunas-tunas aksilar juga berdasarkan pada prinsip pematahan dominasi apikal. Oleh karena itu, pertumbuhan tunas-tunas aksilar ini terjadi jika eksplan (mata tunas) ditanam pada media yang mengandung sitokinin dalam konsentrasi cukup tinggi sehingga sitokinin ini dapat menghentikan dominasi pucuk apikal dan menyebabkan berkembangnya tunas-tunas aksilar. Tunas aksilar yang terbentuk selanjutnya dipisah-pisahkan dan dapat langsung ditanam pada media pengakaran sehingga diperoleh tanaman baru yang sempurna atau digunakan kembali sebagai bahan tanam untuk perbanyakan selanjutnya. Tunas-tunas tersebut selanjutnya diakarkan, diaklimatisasi dan selanjutnya ditanam di lapangan. <br />
<br />
4) Induksi pembentukan tunas dari meristem bunga<br />
Meristem bunga dapat juga dirangsang untuk membentuk tunas-tunas vegetatif dalam kondisi invitro. Eksplan yang digunakan adalah inflorescence bunga yang belum matang (immature inflorescences) yaitu yang belum membentuk organ-organ kelamin jantan dan betinanya. Penggunaan infloresence yang telah dewasa akan menghasilkan pembentukan organ bunga bukan kuncup vegetatif. <br />
<br />
5) Inisiasi langsung tunas adventif<br />
Tunas adventif adalah tunas yang terbentuk dari eksplan pada bagian yang bukan merupakan tempat asal terbentuknya (bukan dari mata tunas atau buku). Tunas-tunas adventif ini dapat terbentuk langsung dari eksplan tanpa melalui proses terbentuknya kalus terlebih dahulu. Teknik ini merupakan salah satu teknik mikropropagasi yang juga banyak dilakukan dan dapat menghasilkan plantlet dalam jumlah jauh lebih banyak dari teknik terdahulu (pembentukan tunas aksilar). Proses pembentukan tunas adventif langsung dari jaringan eksplan seperti akar, pucuk dan bunga disebut organogenesis. <br />
<br />
Terjadinya organogenesis dipacu oleh adanya komponen-komponen seperti medium, komponen endogen selama eksplan mulai dikulturkan, dan senyawa-senyawa yang terbawa selama inisiasi eskplan. Selain itu organogenesis dipacu juga oleh keberadaan zat pengatur tumbuh eksogen di dalam medium. Sebagai contoh rasio antara auksin yang tinggi: sitokinin akan menginduksi eksplan kearah pembentukan akar pada kalus tanaman tembakau tetapi sebaliknya jika pemberian auksin rendah: sitokinin akan memacu kearah tunas. Tunas dan akar terbentuk pada beberapa lapis sel tipis pada eksplan beberapa spesies oleh adanya perbedaan konsentrasi antara auksin dan sitokinin. Inisiasi akar dapat dipacu dengan penambahan NAA dan zeatin dan pembentukan tunas dipacu dengan penambahan sitokinin seperti zeatin atau benzylaminopurine tanpa penambahan auksin. <br />
<br />
Menurut Torrey (1966 dalam Dodds dan Roberts, 1983) membuat hipotesis bahwa organogenesis dari kalus diinisiasi dengan pembentukan kluster sel-sel meristem (meristemoid) mampu merespon pada faktor-faktor dalam jaringan untuk memproduksi primordium. Inisiasi pembentukan akar, tunas dan embrioid juga dipengaruhi oleh faktor-faktor internal alamiah. <br />
<br />
Beberapa faktor yang berpengaruh terhadap rhizogenesis termasuk auksin, karbohidrat, pencahayaan, dan fotoperiode. Pada beberapa kultur jaringan auksin memacu pembentukan akar, sedangkan adanya auksin eksogen dapat menghambatnya dan rhizogenesis dapat distimulasi oleh anti-auksin.<br />
<br />
Keberhasilan pembentukan tunas adventif secara langsung ini sangat tergantung pada bagian tanaman yang digunakan sebagai eksplan serta sangat dipengaruhi oleh spesies atau varietas tanaman asal eskplan tersebut. Pada tanaman yang responsif, hampir semua bagian tanaman (daun, akar, batang, meristem, dll.) dapat dirangsang membentuk organ adventif, namun pada tanaman lainnya tunas adventif ini hanya dapat terbentuk pada bagian-bagian tanaman tertentu saja seperti umbi lapis, embryo atau kecambah.<br />
<br />
Seperti halnya teknik mikropropagasi lainnya, tunas adventif secara langsung ini terbentuk melalui serangkaian tahap mulai inisiasi (Tahap 1). Setelah eksplan berada pada kondisi aseptis dan tunas mulai tumbuh, eksplan dapat langsung disubkulturkan ke media perbanyakan (atau media yang sama dengan inisiasi: tergantung varietas) untuk memperbanyak tunas-tunas adventif dari mata tunas adventif yang telah terbentuk pada tahap sebelumnya. Tunas-tunas tersebut selanjutnya dipisahkan, diakarkan dan diaklimatisasi untuk memproduksi tanaman lengkap dan utuh yang dapat tumbuh dalam keadaan alamiah.<br />
<br />
6) Somatik embryogenesis langsung<br />
Embrio aseksual atau embrio somatik (somatic embryo) adalah embrio yang terbentuk bukan dari penyatuan sel-sel gamet jantan dan betina atau dengan kata lain embrio yang terbentuk dari jaringan vegetatif/somatik. Embrio ini dapat terbentuk dari jaringan tanaman yang dikulturkan tanpa melalui proses yang dikenal dengan nama somatic embryogenesis. Jika proses ini terbentuk langsung pada eksplan tanpa melalui proses pembentukan kalus terlebih dahulu, maka prosesnya disebut somatic embryogenesis langsung (direct somatic embryogenesis). <br />
<br />
7) Pembentukan organ penyimpan cadangan makanan mikro<br />
Beberapa jenis tanaman dapat dikembangbiakan secara vegetatif dengan menggunakan organ penyimpanan seperti tuber, rhizome, bulbus, dll. Organ-organ penyimpanan ini juga bisa dihasilkan pada tanaman-tanaman yang memang secara alamiah memproduksi organ penyimpanan tersebut. Teknik untuk mendapatkan organ penyimpanan ini sangat bervariasi tergantung pada jenis jaringan yang dikulturkan. Organ penyimpanan mikro ini dapat digunakan sebagai bibit untuk penanaman langsung di lapangan atau ditanam untuk produksi umbi-umbi bibit.adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-13543416160136300182010-02-16T22:16:00.000-08:002010-02-24T22:20:26.929-08:00MIKROPROPAGATIONKlonal invitro propagation known as mikropropagasi. The word clone was first used by Webber for the cultivation of plants produced from vegetative propagation. So is the multiplication klonal propagation of individual genes identified through asexual reproduction while the clones themselves are derivatives of plant population (derived) from a single individual produced by asexual reproduction.<br />
<br />
Along with the development and advancement of understanding the culture of today's network techniques have used tissue culture for various purposes, including seed industry. Micro propagation techniques (mikropropagasi) has long been used and is one interesting and classic examples of the application of tissue culture techniques. This technique is done by planting shoots eksplan of its meristemnya network known as culture techniques shoots (shoot tip culture) or the lateral buds to grow by one or more books (single node and multiple node culture). Last technique is also known by the term invitro layering.<br />
<br />
Micro propagation can generally be interpreted as an attempt to grow the plants in aseptic medium and reproduce such parts of the plant to produce the perfect plant in large quantities. Its main objective is to produce plants in large numbers and a short time.<br />
<br />
This technique is also known as clonning efforts to produce clones of plants from vegetative tissue. Therefore plants produced through this effort clonning is identical or similar to its parent. To know more about mikropropagasi will discuss about:<br />
a. Technical Benefits Mikropropagasi<br />
b. The Invitro Propagation Method<br />
c. Factors Affecting the Success of Invitro Plant Propagation<br />
d. Mikropropagasi kinds. <br />
<br />
<a name='more'></a><br />
<br />
Technical Benefits Mikropropagasi<br />
Benefits Mikropropagasi in Plant Breeding<br />
Mikropropagasi techniques in plant breeding is generally used, among others, to:<br />
1) Generate a disease-free plants (nematodes, Mycoplasma, viroid, viruses, and fungi)<br />
2) Generate new cultivars or superior plants, a new hybrid, clone selection and local, and elite genotypes<br />
3) Generate a male sterile strain of elders<br />
4) Generate a spontaneous mutant induction<br />
5) Making genetic variation.<br />
<br />
In addition to these benefits, the multiplication by tissue culture techniques also have shortcomings, among others that this effort had required special skills, production support facilities in particular, need special methods to optimize the production of each crop varieties and species, and because the adult method This is a lot of manpower is generally higher production costs.<br />
<br />
In addition it can happen that the plant variety produced from invitro propagation of plants produced so different from the parent. This variation is known as the variations due to variations appear somaklonal of clones produced from somatic organs (vegetative). This can happen because the plants continuously and in a long time planted and propagated in media containing certain growth hormones.<br />
<br />
This variation may also arise when eksplan grown in medium that enables the formation of callus. Cell division is very fast on callus can cause genetic changes in cells due to irregularities callus genetic information received by each of these callus cells. Somaklonal variation can be reduced by:<br />
1) Limit the number of sub-culture and perbanyakannya,<br />
2) Planting in the medium without growth hormone for one or two sub-cultures and periods<br />
3) If possible avoid the multiplication of the callus culture. However, in some types of plants, especially plants that can not be propagated by cuttings and difficult stimulated formation adventifnya shoots the callus culture of diregenerasikan through organogenesis and embryogenesis is an alternative that allows propagation. If somaklonal variations can not be avoided, should be testing the properties of plants before clones diregenerasikan sold commercially.<br />
<br />
b. Micro Propagation Methods In Invitro<br />
Vegetative propagation methods of invitro plant is a development of techniques of vegetative propagation have been done conventionally as cuttings, layering and grafting. Conventional propagation purpose, such as cuttings, is to stimulate the formation of adventif organs (roots on stem cuttings, roots and shoots in the leaf cuttings and root cuttings) on the material and the number of seeds cuttings obtained from cuttings material is generally only one. On the vegetative propagation of invitro generally used not only to stimulate the formation of plant organs (roots, stems and leaves) but also before memperbanyaknya small plants (plantlet) was transferred from culture tubes to the field.<br />
<br />
Methods that can be done in the plant mikropropagasi done in stages starting from stock preparation and treatment plant (phase 0) to the acclimatization phase (phase IV).<br />
Above have been described that mikropropagasi done in several stages. These stages are not only explains mikropropagasi procedures, but also explains the changes in the environment and culture, such as changes in the composition and concentration of growth regulator used in the media. There are five stages in mikropropagasi, namely:<br />
Stage 0: the preparation phase /preparation<br />
Phase 1: induction phase <br />
Stage 2: stage multiplication multiplication<br />
Stage 3: stage embeddedness<br />
Stage 4: stage transplants (moving) to the terrestrial media. <br />
<br />
Phase 0: preparation (preparation), the selection and preparation of the parent tree<br />
This stage is before eksplan taken for propagation. Parent trees will be used as a source of eksplan should be chosen carefully. This tree is a tree of the species or that will be multiplied verietas, Vigor has a healthy and free from symptoms of pest or disease attack. Parent tree or plant part that will be taken should be treated as a special eksplan to mikropropagasi succeed.<br />
Treatments include:<br />
1) Planting in the green house or a pot to reduce sources of contaminants<br />
2) Providing the appropriate environment or chemical treatments to improve<br />
speed multiplication in invitro conditions<br />
3) Indexing or other procedures to determine the existence of systemic disease by viruses or bacteria<br />
4) stimulation of growth dormant buds.<br />
<br />
At the beginning of tissue culture work on the biggest problem faced is overcoming contamination. Eksplan taking place very influential on the size of the risk of contamination by fungal infections. Eksplan taken from a secure greenhouse conditions would be far kehegienisannya can reduce the risk of contamination by fungal infection than if eksplan taken from the field. But there is more difficult to avoid contamination of bacteria, because it is often difficult to distinguish whether the contamination originated from bacteria endogin or eksogin.<br />
<br />
Ideally the parent plant that will serve as eksplan should be planted in the greenhouse kehegienisannya awake. This not only can reduce populations of microorganisms that live on the surface of the plant, but also helps to produce a quality crop.<br />
<br />
At stage 0 includes also some interventions that can make more appropriate eksplan or better prepared as an initial material. Factors that influence the parent plant is dimikropropagasi light, temperature and growth regulator substances.<br />
<br />
Stage 1: initial stage or induction (initiation)<br />
This initial stage is very important and decisive for the success mikropropagasi. The success of this first stage seen from the success of planting eksplan aseptic conditions (free of any contaminants) and should be followed with appropriate early growth eksplan planting purposes (eg: an extension of shoots, the early growth of shoots, or the growth of callus on eksplan). After 1-2 weeks of incubation, culture contaminated by bacteria or fungi (either on media or eksplannya) removed. This stage is completed and culture can be moved to the next level if that is not contaminated eksplan has grown in line with expectations (eg lateral buds or shoots growing adventif). For contamination eksplan experiencing severe or difficult to be sterilized so eksplan be planted prior to the incubation media or the establishment media that contain only sugar and so only for the purpose of insulation is not contaminated eskplan before phase 1 is initiated at mikropropagasi.<br />
<br />
The purpose of this stage is to produce axenic cultures. For most jobs mikropropagasi, eksplan selected is aksilar or terminal buds. Factors that influence the success of this phase are:<br />
1) Age the parent plant<br />
2) Age of physiological eksplan<br />
3) stage of development eksplan<br />
4) The size of eksplan.<br />
<br />
Hypersensitive reaction<br />
When plant tissue is exposed to stressful situations such as mechanical injury, complex phenolic metabolism stimulated. These interventions cause hypersensitivity reactions, such as:<br />
<br />
1) Removing the contents of cells damaged<br />
2) The reactions in the neighboring cells, but without showing symptoms of the injury itself<br />
3) And / or die prematurely from the cells in a specific environment where the injury or infection.<br />
<br />
In general, complex phenolic metabolism have 3 types of reactions in response to stress or injury, namely:<br />
1) Oxidation of phenolic complex formation (the appearance and materials quinon compounds polymerisasi)<br />
2) The formation of monomeric derivatives<br />
3) Formation of phenolic polymer derivatives.<br />
<br />
Formation of phenolic monomers in the network can race to accumulate a large number of products, or the emergence of new products that play a role in the protection mechanisms of tissue injury. The role of this pruduk can form a physical barrier against invasion (like lignin), or compounds mikrobia inhibitor of growth (such as quinon or fitoalexin).<br />
<br />
Generally, networks of complex phenolic compounds containing a high concentration, it is difficult for the network dikulturkan. Phenol compounds are unstable and the product is very easy to oxidize and phenol can be oxidized fitotoksit.<br />
<br />
Strategies to reduce or eliminate these complex phenolic compounds are:<br />
1) Washing or cleaning products with a complex phenolic compounds to clean it by soaking into the water on the long-term or mengabsorbsinya with activated charcoal or polyvinylpyrrolidone compounds)<br />
2) Inhibit the enzyme work khelat agent fenolase<br />
3) reduce the activity and the ability fenolase substrate by using low pH, with the addition of antioxidant compounds such as ascorbic acid, citric acid or menginkubasikan culture in a dark room<br />
4) reduce the stress on eksplan, especially at the time of sterilization or planting, the parent plant hygiene can reduce stress<br />
5) Use of specific mikroelemen can stimulate the formation of phenol compounds, such as Mn2 + (acting as cofactor peroksidasi) and Cu2 + (is part of the enzyme complex fenolase). Therefore, for networks that produce excessive phenolic complex is suggested to reduce the concentration or not to use these elements in the media.<br />
6) Menginkubasikan culture in low-temperature room<br />
7) We recommend that before eksplan treatment planted in the media placed on the media without growth regulator substances to reduce pencoklatan occurrence eksplan or penghitaman on.<br />
<br />
Stage 2: stage propagation (multiplication)<br />
The purpose of this stage is to acquire and grow shoots. Axenik culture that had been produced on stage 1 and stage 2 was transferred to the medium-rich eksplan cytokines that can produce a lot of shoots at stage 3 then later shoots are transferred to the rooting medium to stimulate root growth.<br />
At this stage, eksplan can also form a callus (callogenesis) or form a bud (caulogenesis). On callus growth and embrioid often produced embrioid each individual will be forming new plants (somatic embryogenesis), or sometimes produce meristemoid that will grow into shoots (organogenesis). Callogenesis often causes the genetic aberration known as somaklonal variations, so that the resulting plants are not identical to the parent plant.<br />
Shoots obtained at this stage is used as an ingredient next multiplication, and therefore at this stage do a lot of sub-culture to double the amount produced plantlet. At this stage, shoots produced cut with node single-node/multiple culture techniques and by taking a bud for propagation eksplan. Materials are then planted in the new media generally contain cytokines at concentrations higher than auksin. At this stage you can use liquid media (media without order), semi-solid or solid media.<br />
With appropriate modifications, the media, new shoots will grow from eksplan pieces. This stage is generally done as much as 8-10 times that will be produced a large number of shoots (shoots thousands) of one eksplan at initiation stage. Shoots which are then raised or mikropropagasi rooted at the next stage.<br />
<br />
Stage 3: preparation prior to plantlet acclimatization (breeding stage)<br />
Bud or plantlet generated from the 2nd stage is generally still very small or shoots that have not completed the roots that have not been able to support growth invivo conditions. Therefore, in this stage each of the resulting plantlet grown for enlargement, rooting and stimulation fotosintesisnya activities. Techniques to get ready for plantula moved to the media at this stage of terrestrial 4 among others, are:<br />
1) Media for rooting and shoot extension. Rooting media are used without the addition of growth regulating substances. Cluster of shoots produced in phase 2 is stored in the media without ZPT with very high humidity<br />
2) Individual shoots (propagule) disubkultur to reduce the concentration of media with or without the addition of increasing concentrations of cytokines and auksin and sometimes by reducing the concentration of inorganic compounds. In some types of rooting plants can be carried out by the results menempakan bud stage 2 (propagule) are placed in liquid medium aeration is better than in the solid media. Or by propagule transfer to media containing auksin for 1-2 days, then again to the media disubkultur without auksin (root induction stimulated by the auksin, but root growth can be inhibited by the presence in the media auksin). Or dipped in a solution of propagule pangakaran (auksin) for a while and then grown in medium without auksin<br />
3) the elongation stage can be reached by putting in the medium to propagule without cytokines or with very low concentrations selamas 2-4 weeks. In some plants use the addition of GA3 in the medium. Next propagule transferred to other media such as the previous technique<br />
4) Use praaklimatisasi media and culture environment with greater intensity of illumination light for the stimulation of photosynthetic activity such as use of media with low concentrations of sugar / no sugar, the addition of light intensity, and treatment with carbon dioxide.<br />
<br />
Stage 4: acclimatization<br />
This acclimatization stage is the stage of plantet transfer to invitro conditions invivo conditions. This stage is very important and must be done carefully, because if not done properly then most produced plantet can die / disappear. Plantlet removed from the bottle and attached to the roots cleaned, soaked in a fungicide solution and planted in compost or clean porous medium to stimulate the formation of serabutnya roots. To prevent deaths due to transpiration plantlet, plantlet disungkup with plastic or placed in a room with high humidity, the temperature of the room and placed a shaded place with the light intensity of 30%. In some cases, the leaves of plants sprayed with anti transpirant (eg Abscicic acid) to prevent too great evaporation from the leaves. Slowly, humidity, light intensity is reduced and added to stimulate photosynthesis. <br />
<br />
c. Factors that Impact on Successful Mikropropagasi<br />
1) plant genotype<br />
One of the factors that influence growth and morphogenesis eksplan in invitro culture is eksplan genotypes isolated from plants. The research results showed that the response of each plant eksplan varies depending on the species, even the varieties, or plant origin such eksplan. The influence of these genotypes are closely related to other factors that influence growth eksplan, such as nutritional needs, growth regulating substances, and cultural environment. Therefore, the media composition, growth regulating substances and the growth environment required by each crop varieties vary although tissue culture technique used the same.<br />
Plant genotypic response differences can be observed in the difference eksplan each variety to grow and regenerate. Each crop varieties differ in their ability to stimulate the growth of shoots aksilar, both the number of buds and shoots aksilarnya growth rate. It is also common in the formation of callus, callus growth and regeneration of callus into complete plants either through the formation of organs adventif or somatic embryos. Organ regeneration and development of somatic embryos adventif and also very much determined by the parent plant varieties. The difference is due to genetic effects due to differences in the genetic control of each variety and sex of the parent plant.<br />
<br />
2) Media culture<br />
Differences of media composition, the composition of growth regulating substances and the type of media used will greatly affect the growth and eksplan the dikulturkan regeneration.<br />
a) The composition of the media. Media composition differences, such as the type and composition of inorganic salts, organic compounds, growth regulating substances influence eksplan response time dikulturkan. Medium composition differences are usually strongly influenced the direction of growth and regeneration eksplan. Nevertheless, the media has been formulated not only apply to one species and plant eksplan. Several types of formulations used and even the media in general for different types and varieties of plants eksplan, such as MS medium. But there are also several types of media that are formulated for specific crops such as WPM, VW etc.. These media can be used for various purposes such as seed germination, shoots culture, callus culture, callus regeneration via organogenesis and embryogenesis. Media are required for seed germination, stimulation aksilar shoots are generally more modest than the media for callus regeneration through organogenesis and embryogenesis.<br />
b) The composition of growth hormone. Composition and concentration of growth hormone was added to the medium influenced the direction of growth and eksplan the dikulturkan regeneration. Composition and concentration of growth hormone are added to the culture medium depends on the type of dikulturkan and eksplan purpose pengkulturannya. Optimal concentration of growth hormone is added to the medium depends also from the eksplan and dikulturkan endogenous growth hormone content contained in these eksplan. Appropriate composition may be estimated through experiments that have been done before with the experiment to determine the composition of growth hormone according to the needs and direction of the desired growth eksplan.<br />
<br />
Growth hormone is used for the invitro propagation is auksin groups, cytokines, giberelin, and the growth retardant. A common Auksin is IAA (Indole Acetic Acid), IBA (Indole Butyric Acid), NAA (Naphtalena Acetic Acid), and 2,4-D (2,4-dichlorophenoxy Acetic Acid). In addition some researchers at several plants using the CPA as well (Chlorophenoxy Acetic Acid). Cytokines that are widely used Kinetin (Furfuryl Amino Purine), BAP / BA (Benzyl Amino Purine / Benzyl adenine), 2 iP (2-isopentenyl adenine). Several other cytokines are also used zeatin, thidiazuron and PBA (6 (benzylamino) -9 - (2-tetrahydropyranyl)-9H-Purine). Giberellin group growth hormone most commonly used is to GA3, but there are some researchers who use the GA4 and GA7, while the growth retardant is often used Ancymidol, Paraclobutrazol and TIBA, ABA and CCC.<br />
c) Physical state media. Media commonly used in tissue culture is the medium of solid, semi-solid medium and liquid medium. Physical conditions will affect the growth of media culture, the pace of growth and differentiation. This medium physical conditions affecting growth partly because of its effect on the osmolarity of the solution in the media and the availability of oxygen for growth eksplan the dikulturkan.<br />
<br />
Media commonly used in mikropropagasi is semi-solid medium (semi-solid) by adding to. Semi-solid media was used for several reasons, among others: small eksplan easily seen in dense media; for eksplan culture remains at the same orientation; eksplan is above the surface of the media so that no additional aeration techniques required to culture; orientation growth of shoots and roots fixed; and callus is not broken as if placed in a liquid medium. But adding that in some cases inhibits the growth because of: a compound that may contain inhibitors that can inhibit morphogenesis several cultures or slow the growth of culture; eksudasi phenolic from eksplan absorbed by the media eksplan attached so that it can affect the growth eksplan; to be washed from the roots before diaklimatisasi; and needs more time to wash glasses for example culture bottles should diautoclave to dissolve the order before washing.<br />
<br />
3) Environmental Growing<br />
a) Temperature. Plants generally grow in an environment with a temperature that is not the same each time, for example in the day and night conditions with the plant having a temperature difference large enough. Such circumstances could be done in invitro culture by adjusting the temperature day and night in the living culture, but during the tissue culture laboratory was set at room temperature is a constant culture both at day or night. Generally the temperature used in invitro culture is higher than the temperature conditions invivo. The goal is to accelerate the growth and morphogenesis eksplan.<br />
<br />
In most laboratories, which use temperature is constant, ie 25 ° C (temperature range 17-32 ° C). Tropical plants generally dikulturkan at temperatures slightly higher than the plants of the four seasons, namely 27 ° C (temperature range 24-32 ° C). When day and night temperature set differently, then the difference is generally 4-8 ° C, the typical variation is 25 ° C day and 20 ° C night, or 28 ° C day and 24 ° C night. Although nearly all plants can be grown in the temperature range, but the temperature needs for each plant species are generally different. Plants can grow well at its optimum temperature. At room temperature under the optimum culture, eksplan slower growth, but at temperatures above the optimum plant growth is also hampered due to the high rate of respiration eksplan.<br />
<br />
b) relative humidity. Relative humidity in the culture bottle with the mouth closed bottle is generally quite high, and it ranged between 80-99%. If the bottle's mouth closed a little loose then the relative humidity in the culture bottles may be lower than 80%. While the relative humidity in the culture generally is about 70%. If the relative humidity of the culture room under 70% then the media will result in a culture bottle (which is not sealed) will quickly evaporate and dry so that eksplan and plantlet will quickly run out dikulturkan media. However, the air humidity in the culture bottles that are too high cause abnormal growth of plant leaves, weak, easily broken, small plants, but too succulent. Plant condition is called vitrifikasi or hiperhidrocity. Sub-culture to another medium or small planlet put this in a bottle with a loose lid, cover with a filter, or put silica gel in the bottle culture can help overcome this problem.<br />
c) Light. Just as plant growth invivo conditions, the quantity and quality of light, the intensity, long wavelength radiation and light affect the growth eksplan in invitro culture. Growth of organs or tissue in culture invitro plants are generally not inhibited by light, but the callus growth is generally inhibited by light.<br />
<br />
In invitro propagation of plants, culture in general diinkubasikan storage space by radiation. Shoots generally stimulated growth by irradiation, except in the propagation technique that begins with the growth of callus. Light source on the space of this culture is generally flourescent light (TL). This is because the TL lamps produce white light, except that TL light at room temperature did not increase drastically culture (only increased slightly). The intensity of light used in the culture generally much lower (1 / 10) of the required light intensity in the normal plants. The intensity of light in the room for the growth of the shoot cultures generally range between 600-1000 lux. Germination and root initiation is generally done at a lower light intensity.<br />
<br />
In addition to light intensity, while irradiation or photoperiodisitas also affect the eksplan growth dikulturkan. Long exposures are generally set according to the needs of plants according to their natural condition. Of light and dark periods are generally set in the range of 8-16 hours of light and dark hours depending 16-8 crop varieties and eksplan the dikulturkan. Period of day / night (light / dark) is set automatically using a timer placed on the light switch in the culture. With this technique a constant illumination can be adjusted according to crop needs.<br />
<br />
4) The condition Eksplan<br />
Growth and morphogenesis in mikropropagasi highly influenced by plant tissue is used as eksplan. Eksplan genetic factors other than those mentioned above, the conditions that affect the success eksplan technique mikropropagasi is eksplan type, size, age and physiological phase of the network used as eksplan.<br />
<br />
Although each plant cell has the ability totipotensi, but each network has a capacity different to grow and regenerate in tissue culture. Therefore, the type used for eksplan each culture vary depending on the destination pengkulturannya.<br />
<br />
Eksplan age is very influential on the eksplan ability to grow and regenerate. Eksplan generally derived from plant tissue is still young (juvenile) more easily grow and regenerate compared with differentiated network has continued. Young tissue generally have cells that actively divide with the cell wall complex that not more easy to modify in culture than the old network. Therefore, the initiation of the culture is usually done by using the young shoots, young buds, hipokotil, immature inflorescence, etc.. If eksplan taken from adult plants, the parent plant rejuvenilisasi through pruning or fertilizing can help to get young people to culture eksplan more successful.<br />
<br />
Eksplan size also affects the culture of success. Eksplan with small sizes more easily sterilized and does not need space and lots of media, but its ability to regenerate is also smaller, so required a more complex media for growth and regeneration. Conversely the greater eksplan, the more likely to carry diseases and even more difficult to be sterilized, and the media needs more culture. Eskplan the appropriate size depends on the type of plants that dikulturkan, techniques and pengkulturannya goals.<br />
<br />
d. Various Mikropropagasi<br />
1) Production of plants from the shoots aksilar<br />
Crop production by stimulating the formation of shoots mikropropagasi technique aksilar is the most common. There are 2 (two) aksilar bud production methods made the culture of shoots (shoot culture or shoot-tip culture) and culture bud eye (one eye buds: a single-node culture, more than one eye shoot: a multiple-node culture). Both culture techniques are based on the principle of stimulating the formation or emergence of side shoots by breaking the apical dominance of the apical meristem.<br />
<br />
2) Culture shoots (shoot culture or shoot-tip culture)<br />
Culture shoots (shoot culture) is a technique that mikropropagasi done in a way that contains mengkulturkan eksplan top meristem (apical and lateral) with excitation and propagation purposes tunas-tunas/cabang-cabang aksilar. Aksilar shoots which are then propagated through the same procedure as eksplan initially and then rooted and grown in invivo conditions.<br />
<br />
The term used for this technique depends on the culture of shoots eksplan used. If eksplan used is the tip apical buds (± 20 mm long) just so the technique is known as shoot-tip culture, but when used is eksplan top end of the shoot apical and other parts below it called a shoot culture. Eksplan size used affects the success of culture shoots.<br />
<br />
The smaller eksplan, the less likely to contamination by microorganisms but also less ability to regenerate and reproduce themselves. Conversely, the greater eksplan used, the greater its ability to adapt in invitro conditions, but also the greater the chances for contamination, the more need for the media and the larger container / bottle culture needed. Therefore, please note eksplan appropriate size for each variety and species of plants.<br />
<br />
Growth of shoots, bud initiation and propagation resulting aksilar generally stimulated by adding growth hormone (mostly cytokines) into the growth media. This treatment can stimulate the growth of side shoots and break the apical dominance of shoots that dikulturkan. In addition, apical dominance can also be relieved by other treatments such as trimming the leaves contained in the books or put eskpan shoots in a horizontal position. Shoots produced aksilar then used as a miniature cuttings for subsequent propagation process. With this technique, and accompanied by a sub-culture can be obtained from plantet lot eksplan one. By limiting the number of sub-cultures to a maximum of 8-10 times the plants can be obtained clones of true-to-type.<br />
<br />
3) Culture eyes shoots / Single-node or multiple-node culture (Invitro layering)<br />
These shoots eye culture is one of the techniques used for invitro propagation of plants by stimulating the emergence of aksilar shoots sprout from the eyes dikulturkan. Just as culture pieces, which are used in eksplan culture can shoot the eye from lateral buds, side shoots or part of the stem containing one or more eye shoots (containing one or more books). Known two culture techniques bud eye is the eye eksplan containing more than one bud horizontally planted on solid medium (invitro technique of layering) or any book containing one bud eye is cut and planted separately in each culture bottle.<br />
<br />
Like buds culture techniques, growth of shoots aksilar also based on the principle of breaking the apical dominance. Therefore, the growth of shoots aksilar occurs when eksplan (eye shoots) grown in medium containing cytokines in high enough concentrations of these cytokines can stop the dominance of apical buds and lead to the development aksilar shoots. Aksilar buds formed later split and can be directly planted in the rooting medium from which new plants are perfect or re-used as planting material for further multiplication. These shoots then rooted, diaklimatisasi and then planted in the field.<br />
<br />
4) induced the formation of flower buds from the meristem<br />
Meristem flowers can also be stimulated to form vegetative shoots in invitro conditions. Is used Eksplan flower inflorescence immature (Immature inflorescences) that are not yet formed sexual organs of males and females. The use of adult infloresence will produce the formation of flower organs rather than vegetative buds.<br />
<br />
5) Initiation of shoot directly adventif<br />
Adventif buds are formed from buds at the eksplan that is not a place of origin of the formation (not from the eyes of the shoot or books). Adventif shoots can be formed directly from eksplan without going through the process of callus formation first. This technique is a technique which is also a lot mikropropagasi done and can result in a number of plantlet far more than previous techniques (aksilar bud formation). Adventif bud formation process directly from eksplan networks such as roots, shoots and flowers called organogenesis.<br />
<br />
Organogenesis occurrence spurred by the presence of components such as medium, the endogenous components during eksplan started dikulturkan, and compounds eskplan carried during initiation. In addition organogenesis also spurred by the presence of exogenous growth regulating substances in the medium. For example, the ratio between the high auksin: eksplan induces cytokines towards callus formation on roots of tobacco plants but on the contrary, if the low ratings auksin: cytokines will accelerate towards the bud. Shoots and roots formed in several thin layers of cells in several species eksplan by the concentration difference between auksin and cytokines. Root initiation can be stimulated by the addition of NAA and zeatin and bud formation stimulated by the addition of cytokines such as benzylaminopurine or zeatin without adding auksin.<br />
<br />
According to Torrey (1966 in Dodds and Roberts, 1983) hypothesized that organogenesis from callus initiated with the formation of clusters meristem cells (meristemoid) able to respond to factors in the network to produce a primordium. Initiation of the formation of roots, shoots and embrioid also influenced by internal factors naturally.<br />
<br />
Several factors affect rhizogenesis including auksin, carbohydrates, lighting, and fotoperiode. In some tissue culture auksin spur the formation of roots, whereas the exogenous auksin be prevented and rhizogenesis can be stimulated by anti-auksin.<br />
<br />
The success of the formation of shoots directly adventif is highly dependent on plant parts used as well as eksplan strongly influenced by the species or varieties of plants such eskplan origin. In plants that are responsive, almost all parts of the plant (leaf, root, stem, meristem, etc..) Can be stimulated to form adventif organs, but at other plants adventif shoots can only be formed on parts of certain plants such as bulbs layer, embryo or sprouts.<br />
<br />
Like other mikropropagasi techniques, adventif buds are formed directly through a series of stages from initiation (Stage 1). After being on eksplan aseptic conditions and the shoots begin to grow, eksplan directly to the media disubkulturkan propagation (or the same media with initiation: depending on variety) to reproduce adventif shoots sprout from the eyes of adventif been created in the previous stage. Shoots which are then separated, rooted and diaklimatisasi to produce a complete and intact plants that can grow in a natural state.<br />
<br />
6) Direct Somatic embryogenesis<br />
Asexual embryos or somatic embryos (somatic embryos) is not an embryo formed from the union of cells of male and female gametes or embryos in other words, the network formed from vegetative / somatic. These embryos can be formed from plant tissue dikulturkan without due process known as somatic embryogenesis. If this process is formed directly on eksplan without going through the process of callus formation first, then the process is called somatic embryogenesis directly (direct somatic embryogenesis).<br />
<br />
7) The formation of food reserves storage organ micro -<br />
Some types of plants can be vegetatively dikembangbiakan using storage organs such as tuber, rhizome, bulbus, etc.. Storage organs can also be produced in plants that are naturally produce these storage organs. Techniques to obtain storage organs vary widely depending on the type dikulturkan network. This micro storage organs can be used as seed for planting directly in the field or grown for the production of seed bulbs. <br />
<br />
<br />
Bibliography<br />
<br />
Bhojwani, 1990. Plant Tissue Culture: Application & Limitations. <br />
<br />
Bhojwani & Razdan, 1983. Plant Tissue Culture: Theory and practise. <br />
<br />
Debergh & Zimmerman, 1990. Micropropagation: technology & application. <br />
<br />
Evan, Sharp, Amminoto & Yamada., 1983/1984. Handbook of Plant Cell Culture (Vols 1 – 4). <br />
<br />
Gleba & Sytnik, 1984. Protoplast Fusion : Genetic Engineering in Higher Plants. <br />
<br />
Green, Somers, Hacket & Biesboer, 1987. Plant Tissue and Organ Culture. <br />
<br />
Jalil, M., N. Khalid & RY. Othman, 2003. Plant regeneration from embryogenic suspension cultures of Musa acuminata cv. Mas (AA). Plant Cell, Tissue and Organ Culture 75: 209–214, 2003.<br />
<br />
Lee, S.W. 2003. Micropropagation of cavendish banana in Taiwan. FFTC, Pingtung.<br />
<br />
Morris, Scragg, Stafford & Fowler, 1986. Secondary Metabolism in Plant Cell Cultures <br />
<br />
Pierik, 1987. Invitro Culture of Higher Plants. <br />
<br />
Reinert & Yeoman, 1983. Plant Cell & Tissue Culture: A Laboratory Manual. <br />
<br />
Rodrigues, I., 2007. Low-cos tissue culture technology. Centre of Nuclear Energy for Agriculture (CENA). San Paulo. <br />
<br />
Stafford & Warren, 1990. Plant Cell & Tissue Culture. <br />
<br />
Taji, A., P. Kumar and P. Lakshamanan, 2002. Invitro plant breeding. The Haworth Press, Inc. New York. <br />
<br />
Thorpe, 1981. Plant Tissue Culture: Methods & Applications in Agriculture. <br />
<br />
Torres, 1989. Tissue Culture techniques for Horticultural Crops. <br />
<br />
Trigiano, R.N. and D.J. Gray, 2000. Plant tissue culture concepts and laboratory exercises. 2nd edt. CRC Press. London. <br />
<br />
Vasil, 1984. Cell Culture and Somatic cell Genetics of Plants. <br />
<br />
Yeoman, 1986. Plant Cell Culture Technology.adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-36802156133778394272010-01-18T04:44:00.000-08:002010-02-24T22:20:26.945-08:00kultur jaringan<meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C01%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p {mso-margin-top-alt:auto; margin-right:0cm; mso-margin-bottom-alt:auto; margin-left:0cm; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->
</style> <br />
<b> Pengertian</b><br />
Kultur Jaringan adalah teknik perbanyakan tanaman dengan cara mengisolasi bagian tanaman seperti daun, mata tunas, serta menumbuhkan bagian-bagian tersebut dalam media buatan secara aseptik yang kaya nutrisi dan zat pengatur tumbuh dalam wadah tertutup yang tembus cahaya sehingga bagian tanaman dapat memperbanyak diri & bergenerasi menjadi tanaman lengkap. Prinsip utamanya adalah perbanyakan tanaman dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman, menggunakan media buatan yang dilakukan di tempat steril. <br />
Teknik kultur jaringan pada saat ini telah berkembang menjadi teknik perkembangbiakan tanaman yang sangat penting pada berbagai spesies tanaman।<br />
<meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C03%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p {mso-margin-top-alt:auto; margin-right:0cm; mso-margin-bottom-alt:auto; margin-left:0cm; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->
</style> <br />
Teknologi ini dimulai dengan spekulasi ilmuwan dari German bernama Haberlandt pada awal abad ke 20 tentang teori totipotensi। Haberlandt menyatakan bahwa setiap sel mampu tumbuh dan berkembang menjadi tanaman normal jika dikulturkan pada nutrisi dan lingkungan yang tepat.<br />
<br />
<a name='more'></a><br />
<br />
<meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C04%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p {mso-margin-top-alt:auto; margin-right:0cm; mso-margin-bottom-alt:auto; margin-left:0cm; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->
</style> <br />
<b>Sejarah Perkembangan Kultur Jaringan</b><br />
Kultur jaringan tanaman pertama kali berhasil dilakukan ole White pada thaun 1934. Pada tahun 1939, Whiter melaporkan keberhasilannya dalam membuat kultur kalus dari wortel (link to kultur kalus wortel) dan tembakau. Pada tahun 1957, tulisan penting Skoog dan Miller dipublikasikan dimana mereka menyatakan bahwa interkasi kuantitatif antara auksin dan sitokinin menentukan tipe pertumbuhan dan morfogenik yang akan terjadi. Penelitian mereka pada tembakau mengindikasikan bahwa perbandingan auksin dan sitokinin yang tinggi akan menginduksi pengakaran, sedangkan rasio sebaliknya akan menginduksi pembentukan tunas. Akan tetapi pola respon ini tidak berlaku universal.<br />
Temuan penting lainnya adalah hasil penelitian Morel tentang perbanyakan anggrek melalui kultur jaringan pada tahun 1960, dan penggunaan yang meluas media kultur dengan konsentrasi garam mineral yang tinggi, dikembangkan oleh Murashige dan Skoog tahun 1962.<br />
Pengetahuan dasar botani adalah sangat penting dalam kesuksesan kultur jaringan। Pada Bab berikutnya kami akan memberi anda pengertian tentang anatomi dan morfologi tanaman berbunga.<br />
<br />
<br />
<meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C05%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} p {mso-margin-top-alt:auto; margin-right:0cm; mso-margin-bottom-alt:auto; margin-left:0cm; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} /* List Definitions */ @list l0 {mso-list-id:1435855362; mso-list-template-ids:-740547108;} @list l0:level1 {mso-level-tab-stop:36.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt;} ol {margin-bottom:0cm;} ul {margin-bottom:0cm;} -->
</style> <br />
<ol start="1" type="1"><li class="MsoNormal">Perbanyakan cepat dari klon</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Kecepatan multiplikasi sebanyak 5 akan memberikan 2 juta plantlet dalam 9 generasi yang memerlukan waktu 9 – 12 bulan.</div><ol start="2" type="1"><li class="MsoNormal">Keseragaman genetik.</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Karena kultur jaringan merupakan perbanyakan vegetatif, rekombinasi karakter genetik acak yang umum terjadi pada perbanyakan seksual melalui biji, dapat dihindari. Karenanya, anakan yang dihasilkan bersifat identik. Akan tetapi, mutasi dapat terjadi pada kultur jaringan pada saat sel bermultiplikasi, terutama pada kondisi hormone dan hara yang tinggi. Mutasi genetik pada masa multiplikasi vegetatif ini disebut ‘variasi somaklonal’.</div><ol start="3" type="1"><li class="MsoNormal">Kondisi aseptik</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Proses kultur jaringan memerlukan kondisi aseptik, sehingga pemeliharaan kultur tanaman dalam kondisi aseptik memberi bahan tanaman yang bebas pathogen</div><ol start="4" type="1"><li class="MsoNormal">Seleksi tanaman</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Adalah memungkinkan untuk memiliki tanaman dalam jumlah besar pada wadah kultur yang relative kecil. Seperti telah disebutkan sebelumnya, variasi genetik mungkin terjadi. Juga, adalah memungkinkan untuk memberi perlakuan kultur untuk meningkatkan kecepatan mutasi. Perlakkuan dengan bahan kimia (bahan mutasi, hormone) atau fisik (radiasi) dapat digunakan.</div><ol start="5" type="1"><li class="MsoNormal">Stok mikro</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Memelihara stok tanaman dalam jumlah besar mudah dilakukan pada in vitro culture. Stok induk biasanya dipelihara in vitro, dan stek mikro diambil untuk diakarkan di kultur pengakaran atau dengan perbanyakan biasa.</div><ol start="6" type="1"><li class="MsoNormal">Lingkungan terkontrol</li>
<li class="MsoNormal">Konservasi genetik</li>
</ol><div style="margin-left: 36pt;">Kultur jaringan dapat digunakan untuk menyelamatkan spesies tanaman yang terancam (rare and endangered species). Metode dengan pemeliharaan minimal, penyimpanan jangka panjang telah dikembangkan.</div><ol start="8" type="1"><li class="MsoNormal">Teknik kultur jaringan dapat digunakan untuk menyelamatkan hibrida dari spesies yang tidak kompatibel melalui kultur embrio atau kultur ovule.</li>
<li class="MsoNormal">Tanaman haploid dapat diperoleh melaui kultur anther.</li>
<li class="MsoNormal">Produksi tanaman sepanjang tahun.</li>
<li class="MsoNormal">Perbanyakan vegetatif untuk spesies yang sulit diperbanyak secara normal dapat dilakukan melalui kultur jaringan.</li>
</ol>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0tag:blogger.com,1999:blog-9046203259122648336.post-28109515323340033902010-01-12T23:05:00.000-08:002010-02-24T22:20:26.948-08:00CARA SANITASI DAN STERILISASI LABORATORIUM<meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C03%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} -->
</style> <br />
<div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;">Kontaminasi merupakan salah satu faktor pembatas dalam keberhasiln pembiakan tanaman secara kultur jaringan, hal tersebut dapat terjadi setiap saat ddalam masa kultur. Mikroorganisme (jamur, bakter atau virus) yang masuk dan berkembang biak dengan pesat akan menyerang tanaman dalam botol kultur yang akibatnya dapat menghambat pertumbuhan atau mematikan tanaman.</div><div style="text-align: left;"><meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C04%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Wingdings; panose-1:5 0 0 0 0 0 0 0 0 0; mso-font-charset:2; mso-generic-font-family:auto; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:0 268435456 0 0 -2147483648 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} /* List Definitions */ @list l0 {mso-list-id:1619221581; mso-list-type:hybrid; mso-list-template-ids:-1980598526 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693;} @list l0:level1 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:93.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:93.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level2 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:129.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:129.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level3 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:165.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:165.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l0:level4 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:201.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:201.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level5 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:237.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:237.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level6 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:273.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:273.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l0:level7 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:309.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:309.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level8 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:345.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:345.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level9 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:381.0pt; mso-level-number-position:left; margin-left:381.0pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} ol {margin-bottom:0cm;} ul {margin-bottom:0cm;} -->
</style> </div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-indent: 42.75pt;">Idealnya ruangan yang digunakan untuk proses kultur jaringan tanaman bersifat aseptik. Sehingga dibutuhkan ruangan yang sangat bersih dan udara yang kering. Beberapa upaya untuk mencegah munculnya mikro organisme harus dilakukan selama aktifitas kultur jaringan berlangsung.</div><div></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Didalam kultur jaringan dibutuhkan ruanan yang steril sehingga disediakan ruang khusus dan tidak tercampur atau bersentuhan langsung dengan lingkungannya / ruang lain. Karena hal ini dapat menimbulkan kontaminan masuk kedalam laboratorium. Atau bahan kultur.</div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;"></div><a name='more'></a><br />
<div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Untuk mengantisipasi hal-hal tersebut maka diperlukan sterilisasi ruangan sebagai langkah awal dalam usaha pembiakan tanaman secara kultur jaringan.</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Bahan bahan sterilisasi dapat berupa bahan pemutih, yang dicampur dengan air, dan kemudian dipelkan ke lantai. Dan dapat dilakukan menggunakan alkohol maupun menggunakan formalin 5 %.</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Selain lingkungan kerja, kontaminasi dapat berasal dari peralatan kerja, yang digunakan. Oleh karena itu, peralatan kerja harus dalam keadaan steril.terutama peralatan-peralatan yang digunakan dalam proses penanaman.</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Peralatan yang harus steril adalah :</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 93pt; text-align: left; text-indent: -18pt;"><span style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "; font-size: 7;"> </span></span>Laminar Air Flow Cabinet</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 93pt; text-align: left; text-indent: -18pt;"><span style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "; font-size: 7;"> </span></span>Alat-alat diseksi</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 93pt; text-align: left; text-indent: -18pt;"><span style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "; font-size: 7;"> </span></span>Alat-alat gelas </div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 93pt; text-align: left; text-indent: -18pt;"><span style="font-family: Symbol;">·<span style="font-family: "; font-size: 7;"> </span></span>Dan lain sebagainya</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 14.25pt; text-align: left; text-indent: 42.75pt;">Sterilisasi peralatan gelas dan peralatan diseksi dilakukan dengan menggunakan autoklaf baik manual maupun otomatis.</div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify; text-indent: 18pt;"></div><div style="text-align: left;"></div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;">Laminar Air Flow Cabinet merupakan alat yang berfungsi sebagai lemari transfer yang sudah dilengkapi blower dan lampu UV, filter anti mikrobial, dan sistem aerasi udara sehingga dapat membantu mensterilkan ruangan. Apabila sterilisasi peralatan tersebut terjamin dan sumber kontaminasi dapat dikurangi.</div><div class="MsoNormal" style="font-weight: bold; line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;"><br />
</div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;"><span style="font-weight: bold;">LANGKAH KERJA</span> </div><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;"><meta content="text/html; charset=utf-8" equiv="Content-Type"></meta><meta content="Word.Document" name="ProgId"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Generator"></meta><meta content="Microsoft Word 11" name="Originator"></meta><link href="file:///C:%5CDOCUME%7E1%5Ceinstein%5CLOCALS%7E1%5CTemp%5Cmsohtml1%5C05%5Cclip_filelist.xml" rel="File-List"></link><style>
<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:Wingdings; panose-1:5 0 0 0 0 0 0 0 0 0; mso-font-charset:2; mso-generic-font-family:auto; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:0 268435456 0 0 -2147483648 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman";} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:72.0pt 90.0pt 72.0pt 90.0pt; mso-header-margin:36.0pt; mso-footer-margin:36.0pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} /* List Definitions */ @list l0 {mso-list-id:557861232; mso-list-type:hybrid; mso-list-template-ids:744146558 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693;} @list l0:level1 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:52.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:52.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level2 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:88.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:88.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level3 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:124.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:124.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l0:level4 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:160.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:160.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level5 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:196.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:196.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level6 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:232.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:232.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l0:level7 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:268.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:268.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l0:level8 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:304.2pt; mso-level-number-position:left; margin-left:304.2pt; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l0:level9 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:12.0cm; mso-level-number-position:left; margin-left:12.0cm; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l1 {mso-list-id:1767923498; mso-list-type:hybrid; mso-list-template-ids:986605022 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693 67698689 67698691 67698693;} @list l1:level1 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:36.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l1:level2 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:72.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l1:level3 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:108.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l1:level4 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:144.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l1:level5 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:180.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l1:level6 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:216.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} @list l1:level7 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:252.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Symbol; mso-bidi-font-family:Symbol;} @list l1:level8 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:o; mso-level-tab-stop:288.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:"Courier New";} @list l1:level9 {mso-level-number-format:bullet; mso-level-text:; mso-level-tab-stop:324.0pt; mso-level-number-position:left; text-indent:-18.0pt; font-family:Wingdings; mso-bidi-font-family:Wingdings;} ol {margin-bottom:0cm;} ul {margin-bottom:0cm;} -->
</style></div><b> Pencucian botol<o:p></o:p></b> <br />
<ul style="margin-top: 0cm;" type="disc"><li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Keluarkan botol kultur yang telah terkena kontaminasi</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Keluarkan planlet dan media yang telah terkena kontaminasi</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Cuci dengan menggunakan spons dan menggunakan deterjen</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Bilas dengan air bersih</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Bawa ke ruang persiapan dan lakukan pengeringan</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Lakukan sterilisasi botol kultur dengan menggunakan autoklaf dengan suhu 121 <sup>0</sup> C selama 30 menit</li>
<li class="MsoNormal" style="line-height: 150%; text-align: justify;">Susun botol pada tempatnya.</li>
</ul><div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: justify;"><b> <br />
</b></div><b> <br />
</b> <br />
<br />
<div style="text-align: center;"><br />
</div><span style="font-weight: bold;">Sterilisais Laboratorium</span><b> <o:p></o:p></b><br />
<div class="MsoNormal" style="line-height: 150%; margin-left: 18pt; text-align: left; text-indent: 18pt;"></div><ul style="font-family: times new roman;"><li><span style="font-size: 100%;">S</span><span style="font-size: 100%;">iapkan alat dan bahan yang diprlukan</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Lakukan pembersihan kaca terlebih dahulu</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Bersihkan ruangan dengan disapu bersih.</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Lakukan pembersihan alat-alat yang terdapat di ruangan laboratorium dengan mengelap nya dengan kain lap basah</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Susun alat-alat yang tidak rapi</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Rapikan dengan memisahkan menurut ukurannya</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Bersihkan meja yang terdapat dilaboratorium dengan mengelapnya dengan kain lap</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Untuk diruang penanaman lakukan pembersihan laminar dengan menghidupkan lampu UV beberapa menit dan setelah dimatikan lakukan penyemprotan alkohol kedalam laminar air flow.</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Ambil ember dan siapkan air bersih</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Lakukanlah pengepelan lantai agar tidak terdapat kotor pada lantai</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Bersihkan lingkungan luar laboratorium</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Lakukan lah sterilisasi ruang laboratorium dengan menyiapkan formalin 5 %</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Simpan formalin pada petridis dan Simpan ditiap ruangan</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Biarkan beberapa hari agar berfungsi dengan baik</span></li>
<li><span style="font-size: 100%;">Tutup rapat ruangan yang telah disimpan formalin.</span></li>
</ul>adrianahttp://www.blogger.com/profile/08302898704016737169noreply@blogger.com0